水稻叶绿体转化载体pBS的构建及融合基因功能的初步鉴定
http://www.100md.com
2012年5月1日
bar基因,绿色荧光蛋白(sGFP),融合PCR
 |
| 第1页 |
 |
| 第3页 |
参见附件。
高婧 李丁 左佳 贺荣华 韩小霞 邢俊杰 李祺 曹孟良 中南大学研究生院隆平分院杂交水稻国家重点实验室;国家杂交水稻工程技术研究中心;
【摘要】利用PCR方法分别从载体pchN-CAT-Bar和Psk51中分离得到编码膦丝菌素乙酰转移酶基因bar和绿色荧光蛋白基因sgfp,并在bar基因前段连接T7 leader sequence/5′-UTR和T7 10 N-terminus的8个氨基酸序列.运用融合PCR技术,得到bar和sgfp的融合基因片段BS.以水稻叶绿体基因组中的trnI和trnA为同源重组片段,来自烟草叶绿体16S rRNA的Prrn为启动子,psbA基因的TpsbA为终止子,融合片段作为双效筛选标记,构建水稻叶绿体转化载体pBS.大肠杆菌原核表达检测到明显荧光,基因枪轰击TP309愈伤,筛选抗性愈伤.
【关键词】 水稻 叶绿体转化 bar基因 绿色荧光蛋白(sGFP) 融合PCR
【基金】国家973项目(2007CB109007) 国家转基因重大专项(2011ZX08001-001;2011ZX08001-004)
【分类号】S511
1988年Boynton等[1]成功地用野生型叶绿体DNA转化单细胞生物———衣藻突变体,这标志着植物叶绿体不仅是光合作用的重要场所,也可作为植物遗传工程新的转化和表达受体.叶绿体作为新的转化系统,具有定点整合外源基因[2]、表达效率高[3]、母系遗传[4]、环境安全性高[5],可同时
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(4345kb)。