拟南芥转录因子HB22与CRY1相互作用研究
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2013年3月1日
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曾婷 何志敏 段桂芳 赵小英 唐冬英 刘选明 湖南大学生物学院 化学生物传感与计量学国家重点实验室;
【摘要】通过酵母双杂交的方法,从拟南芥转录因子库中筛选出了6个与CRY1相互作用的转录因子.为了测定其中的HB22与CRY1相互作用的强度,采用了ONPG与CPRG两种方法对其β-半乳糖苷酶活性进行了分析.结果显示在蓝光光强为50μmol/m2s,孵育时间为4 h的情况下,蓝光与暗处理情况下的β-半乳糖苷酶活性比值分别为1.668和2.18.进一步设置蓝光处理时间及光强梯度实验数据显示,在蓝光光强为50μmol/m2s孵育时间为3 h时,二者相互作用强度达到最高.说明HB22与CRY1的相互作用具有蓝光响应.对蓝光处理不同时间的野生型col-4与cry1缺失突变体的材料进行HB22基因的定量PCR分析,发现拟南芥cry1缺失突变体中该基因的表达量比野生型中高,在蓝光处理2 h时,缺失突变体中表达量为野生型中的6倍左右.说明CRY1可能介导蓝光抑制HB22基因表达.
【关键词】 酵母双杂交 CRY 转录因子 蓝光响应 蛋白质相互作用
【基金】国家自然科学基金资助项目(31171176) 湖南省自然科学基金资助项目(11JJA002) 湖南省青年骨干教师项目(521298864)
【分类号】Q943
高等植物具有非常灵敏精细的光感受系统和信号转换系统,以感应光信号的方向、光质和能量,并调节其生长发育[1~3].光受体可分为4种类型:光敏色素(phytochrome)、隐花色素(cryptochrome)、趋光素(phototropin)和超级色素(superchrome).其中,隐花色素和趋光素都能吸收蓝光,属于
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