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编号:12712565
甲基转移酶对鼻咽癌细胞中DLC—1基因表达的影响(2)
http://www.100md.com 2014年4月1日 《生命科学研究》 2014年第4期
     1.2方法

    1.2.1RNA的制备

    取细胞1瓶,约1xl06个细胞,PBS液(pH7.2,0.01mol/L)洗涤2次,加入TRlzol l mL,反复吹打均匀;置冰上5min,加入氯仿0.2mL剧烈振摇15s,置冰上2min,11000r/min,4℃离心15min,吸取上层水相至另一新的DEPC处理的离心管中,加异丙醇0.5mL,置-20℃ 20min,11000r/min4℃离心15min,75%乙醇洗涤后用适量DEPC水溶解,-70℃保存备用。

    1.2.2细胞基因组DNA的提取

    取细胞1瓶,约lxl06个,用D-Hanks液洗涤2~3次,0.25%胰酶消化,1000r/min离心5min收集细胞,PBS液(pH7.2,0.01mol/L)洗涤一次,1000r/min离心5min收集细胞,加入裂解液600μL(10mmol/L Tris-HCl pH8.0, 10mmol/L EDTA pH8.0 ......
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