1.2.2不同培养条件对乳腺上皮细胞生长的影响

    根据表1配制8种不同的细胞培养液。将纯化的乳腺上皮细胞分成两组，以每mL1x104个接种于12孔培养板，第一组培养6d后，消化细胞进行计数，按Patterson公式计算群体倍增时间T(T=tlg2/(lg/N0- lg/N1)；(N0：对数生长期末回收细胞数；N1：对数生长期细胞数对数期培养的时间)。第二组进行持续传代培养，统计在8种不同培养条件下细胞的最终传代次数。通过细胞生长群体倍增时间和最终存活的代数评估8种不同培养条件下的培养液对乳腺上皮细胞生长的影响，最终确定乳腺上皮细胞的最佳培养条件。

    1.2.3优化条件下乳腺上皮细胞的生物学特性检测情况检测

    首先无菌状态下取健康牛乳腺组织，采用组织块贴壁法，乳腺组织贴壁培养过程，部分组织会直接迁出乳腺细胞，显微镜下观察，取出只迁乳腺细胞的组织块，转移到新的培养皿，以1.2.2组确定的最适培养条件培养乳腺上皮细胞，显微镜下观察其生物学特性。

    1.2.4优化条件下乳腺上皮细胞的标记蛋白表达

    以1.2.2组确定的最适培养条件组获得的上皮细胞为研究对象，选取第15代细胞，以1x105个细胞接种到载玻片，待细胞在载玻片汇合生长后 ......