用E.Z.N.ATotalRNAKitI试剂盒从草鱼脑、垂体、心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肌肉、肠、卵巢、精巢等组织分离出总RNA，用RevertAidFirst-Strandc.DNASynthesisKit试剂盒以oligo-dT-3'Adaptor为引物合成cDNA的第一条链，根据已知草鱼的FSHR和LHR的开放阅读框序列，用PrimerPrimeier5.0软件设计FSHR和LHR特异性引物，用嵌套式PCR提高其特异性。3'RACE的特异引物为正向引物。

    PCR扩增程序按如下程序进行：94～95T预变性3-5min；94-95℃，0.5-2min；37-70℃；，0.5～2min；70-750.5-1min；25-35个循环，最后70-75℃延伸5-10min。按UNIQ-10柱式DNA胶回收纯化试剂盒说明书进行PCR产物的纯化回收。将回收产物连接到PMD18-T载体上，将连接产物转化到DH5α感受态细胞中，挑取阳性克隆进行培养，提取质粒进行酶切鉴定，由南京金斯瑞公司测序，测序结果通过与引物拼接后，在NCBI上的BLAST(httpy/blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi)中进行同源性物种比对 ......