0.125 010胰酶(含0.020/0 EDTA)消化SCMEC，按不同密度进行传代：1)1：1接种于6孔培养板，用于蛋白样品制备；2)1：5接种于6孔培养板(内预置盖玻片)，用于细胞免疫荧光；3)1：1接种于Millicell插入小室，置于24孑L板(预铺胶质细胞)中，用于跨内皮电阻(TEER)测定。所有培养细胞于37℃50/0 C02培养箱中培养7d，每2—3 d更换培养液。

    1.3.2血管生成素1(Angl)处理培养细胞

    为检测Angl对体外SCMEC屏障功能的影响，于培养第7d用Angl (0.1 mg/L)或Angl( 100 mg/L) +Wortmannin(0.1 μmol/L)处理细胞12 h ......