1.6器官病毒滴度测定

    攻毒后的第5d与第21 d，收集小鼠脾脏和唾液腺，病毒稀释液冰上无菌研磨，匀浆液离心后，上清-80 0C保存。24孔板中的NIH-3T3细胞生长至80%左右，匀浆上清按10倍系列稀释后，各稀释度按每孔100 μL感染3T3细胞。5% C0237 0C孵育th后加入粘性培养基。待细胞形成明显的病毒斑时，根据每孔中病毒斑的数目，计算出各样本器官中的病毒滴度( pfu/mL)，每组小鼠病毒滴度值以x±s值表示。

    1.7统计学分析

    实验数据的评定用Student's test方法，以P<0.05定为统计学显著性差异。存活率是否有意义用Fisher's exact test方法比较实验组和对照组小鼠来确定。

    2实验结果

    2.1 混合免疫pIE-l和pBD2后IE-1特异性抗体检测

    小鼠免疫一次，免疫2周后，剪尾取血收集小鼠血清，用ELISA的方法检测抗IE-1特异性IgG抗体。如表1所示，小鼠经pIE-l单独免疫后可以检测到血清特异性IgG抗体，经pIE-l和pBD2混合免疫后小鼠血清中IgG抗体滴度升高，与单独的pIE—l免疫组相比具有显著差异，说明mBD2对IE-1 DNA疫苗在小鼠体内抗体应答有免疫增强作用。

    2.2 混合免疫pIE一1和pBD2后小鼠的细胞免疫反应

    免疫10 d后用ELISPOT的方法检测小鼠体内分泌IFN-y的脾脏淋巴细胞数量 ......