多二硫键蛋白在大肠杆菌中的表达研究(2)
2大肠杆菌细胞质二硫键的形成2.1 野生型菌株细胞质的还原途径
大肠杆菌细胞质的还原环境不利于蛋白的氧化。Derman等[13] 的开创性工作首先阐明了大肠杆菌细胞质中两条主要的还原途径。一条是硫氧还蛋白途径:包括硫氧还蛋白TrxA和TrxC,并由硫氧还蛋白还原酶TrxB维持还原态;另一条是谷氧还蛋白途径:其核心是谷胱苷肽还原酶(Glu-tathione reductase),它能还原GshA和GshB两种酶,这两类酶与细胞质还原型谷胱甘肽(glu-tathione,GSH)的形成有关。在细胞质中,GSH可直接参与二硫键的还原反应,它首先与底物形成中间体复合物,再由一种谷氧还蛋白(Grxl,Grx2,Grx3)使中间体释放,生成还原态底物和氧化态谷氧还蛋白,后者又在GSH作用下重新恢复还原态[14] 。两条电子传递网络的还原电势均来自细胞质NADPH池[目(图2)。
2.2突变菌株细胞质的氧化途径
在研究野生型菌株细胞质还原途径时,Der-man等[13]发现,同时缺失两个核心基因trxB和gor的菌株无法存活 ......
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