【摘要】目的:探索人胚胎发育过程中胰腺巢蛋白(nestin)阳性细胞表达的变化。方法:应用免疫组织化学EnVision法，检测30例人胚胎胰腺组织中巢蛋白阳性细胞的表达及分布变化。结果:各胎龄段(10～37w)胰腺均有巢蛋白阳性细胞表达，存在于胰岛、间充质和血管中，在腺泡、导管中未发现阳性细胞，胚胎发育晚期阶段(29～37w)巢蛋白阳性细胞高于其它胎龄组。结论:在人胚胎胰腺组织中存在着巢蛋白阳性细胞，该细胞主要分布于胰岛和间充质中。随着胎龄的变化，胰腺巢蛋白阳性细胞数也发生了变化。

    【关键词】巢蛋白;人胚胎;胰腺;阳性细胞

    【中图分类号】R321【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2010)10-015-2

    胰腺干细胞移植可以用来治疗糖尿病，寻找可供移植的胰腺干细胞是近年来人们关注的热点。巢蛋白(nestin)是1990年由lendahl等鉴定出来的，属于第Ⅵ族中间丝蛋白，Mr为240000，是神经干细胞和祖细胞的标志物，也是胰岛干细胞的标志之一[1-2]。虽然已有学者对胚胎胰腺中nestin阳性细胞的表达做过研究，但仅局限在12～16周的胚胎胰腺[3-4]。对于胚胎胰腺发育过程中的阶段性表达及分布变化尚未见报道。本实验用免疫组织化学EnVision二步法，对31例10～37w人胚胎胰腺中nestin的表达进行了检测，了解其在不同胎龄胰腺中表达的差异性，探讨其生物学意义，为临床胰腺移植供体的选择和胰腺干细胞提取提供形态学资料。

    1材料和方法

    1.1材料和分组收集因故终止妊娠的正常胎儿31例，分成3组。A组10～19w10例，B组20～28w11例，C组29～37w10例，各胎儿均取其胰尾，入Bouin液固定20～40h，石蜡包埋制成5μm厚的连续切片。

    1.2方法nestin免疫组织化学采用EnVision二步法，nestin单克隆抗体为Santa Cruz公司产品，试剂盒为DAKO公司产品。主要染色步骤:常规石蜡切片脱蜡至水，3% H2O2室温孵育20min，封闭内源性过氧化物酶 ......