风湿免疫性疾病患者血清骨桥蛋白的检测及意义
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2010年8月1日
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【关键词】骨桥蛋白;系统性红斑狼疮;类风湿关节炎
【中图分类号】R392.7【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2010)16-066-2
骨桥蛋白(Osteopntin,OPN)是一种由多种细胞分泌的细胞外基质磷酸化糖蛋白,参与多种生物学过程,包括细胞的趋化、聚集、粘附、增殖和迁移、免疫调节和信号传导等。OPN被认为是一种与炎症过程有关的促炎细胞因子,在Th1细胞的表达是Th2细胞的19倍,因此在系统性红斑狼疮(SLE)等自身免疫性疾病的发展中也发挥了重要作用。我们检测了SLE和类风湿性关节炎(RA)患者血清中的骨桥蛋白水平,以探讨其临床意义。
1资料与方法
1.1研究对象2007年10月至2008年12月我院住院或门诊随访的风湿性疾病患者109例,男38例,女71例,年龄12～73岁。其中SLE62例,RA47例,临床诊断参照美国风湿协会1997年修订的SLE分类诊断标准[1]和1987年RA分类诊断标准[2]。根据SLE疾病活动指数(DAI),SLE患者中活动期(≥10分)34例,非活动组(<10分)28例;有脏器损害者33例(肾脏损害以持续性蛋白尿,尿蛋白定量>0.5g/24h,伴或不伴血清肌酐升高为准;肺间质病变以肺CT为准;心包炎以心脏彩超为准,胃肠道病变以胃肠CT或彩超为准),无脏器损害者29例。正常对照组42例为健康体检者,男15例,女27例,年龄17～55岁。两组均于清晨采取空腹静脉血3ml,离心分离血清置-20℃冻存待检。
1.2检测方法血清OPN水平检测采用ELISA法进行,试剂盒购自上海西唐生物科技有限公司,操作严格按说明书进行。大致步骤是:取出已包被抗人OPN单抗的酶标板,设置标准孔和待检血清孔,分别加入不同的标准品和待测血清100μl,放置37℃水浴箱中孵育120min,洗板5次后,每孔加入生物素化的抗人OPN抗体工作液100μl,放置37℃水浴箱中孵育60min,洗板后每孔加亲和素化辣根过氧化物酶结合物100μl,37℃水浴箱中孵育60min,洗板后每孔加100μl显色剂TMB显色15min,终止反应并用酶标仪在450nm处读取各孔OD值,建立标准曲线,计算待测血清的OPN含量。
1.3统计学处理测定数据±s以表示,两组间比较用t检验,率的比较用χ2检验,采用SPSS10.0软件计算。
2结果
2.1病例组与正常对照组血清OPN阳性率如表1所示,病例组血清OPN阳性率为71.56%(79/109),其中SLE中OPN阳性率为79.03%(49/62),RA中OPN阳性率为63.83%(30/47)。对照组OPN均为阴性。病例组与对照组的阳性率比较,差异具有显著性(P<0.05)。
表1 SLE和RA患者血清OPN检测结果
组别n阳性数阳性率(%)±s(ng/ml)
病例组1097971.565.01±1.92
SLE624979.035.81±2.22
RA473063.833.01±1.92
对照组4202.01±0.95
2.2病例组与正常对照组血清OPN水平如表1所示,病例组OPN水平为5.01±1.92ng/ml,其中SLE患者血清OPN为5.81±2.22ng/ml,RA患者OPN为3.01±1.92ng/ml,均明显高于正常对照组的2.01±0.95ng/ml,差异具有显著性(P<0.05)。
表2 SLE患者OPN水平与临床资料的关系
组别nOPN(ng/ml)
活动期346.51±2.37
非活动期285.23±1.99
有脏器损害336.81±2.96
无脏器损害295.01±1.82
2.3OPN水平与临床资料的关系将OPN与DAI积分、24h尿蛋白定量进行相关性分析,发现血清OPN水平与SLE的DAI积分和24h尿蛋白定量均呈正相关均为P<0.01,结果见表2。
3讨论
OPN在自身免疫及其它炎症过程中作为一种潜在的促炎症细胞因子起作用,且能促进Th1免疫反应而抑制Th2免疫反应。多种自身免疫性疾病,特别是SLE疾病的活动与Th1/Th2的比率有关。Th1细胞因子水平升高可介导炎症反应,导致不可逆的器官损害。SLE和RA是与大量免疫复合物和自身抗体存在有关的复杂的自身免疫性疾病,在其病理损害中可见大量淋巴细胞、单核细胞和巨噬细胞的浸润。虽然OPN对SLE和RA以及其它一些自身免疫性疾病诊断的特异性如何的相关文献报道并不多,但是Ohshima等[3]分别比较了OPN在RA和骨关节炎(OA)患者及正常对照组的滑膜细胞、滑膜液、血浆中的水平,发现在滑膜细胞和滑膜液中RA患者的OPN水平明显高于OA患者,且与血浆C反应蛋白水平相关,但三组的血浆OPN水平无显著差异,表示OPN在类风湿关节中呈局灶性表达增加,而在血浆中OPN的表达不增加,提示血清OPN对SLE的诊断有一定价值。本文研究发现,SLE和RA的患者的OPN阳性率和血清水平均高于正常对照组,SLE患者的OPN的阳性率和血清水平也高于RA患者。结果提示,OPN作为一种与炎症过程有关的促炎症细胞因子,在自身免疫性疾病的发病过程中可能起一定的作用。
李龙等[4]研究发现狼疮性肾炎(LN)患者肾小管上皮细胞OPN表达明显增高,并与肾间质巨噬细胞浸润数、浸润部位及肾间质病变明显相关,提示OPN在导致LN肾间质损害中起重要作用,从而推断血清OPN水平可能在一定程度上反映了SLE患者有无肾脏损害,提示血清OPN对SLE肾脏损害的诊断和监测上可能有一定的价值。其它文献也报道了OPN与SLE的肾脏损害、活动程度及疾病进展情况有一定的相关性[4-6]。本文结果显示,SLE患者血清OPN水平与患者DAI积分及24h尿蛋白定量等呈明显的正相关性,提示血清OPN水平不仅与蛋白尿有关,而且能反映蛋白尿的程度,也能在一定程度上间接反映肾脏损害的程度,证实血清OPN与SLE的活动度及脏器损害有关。
由于许多自身免疫性疾病的发病机制复杂,病因未明,病情反复,可能有多种细胞因子或其它成分参与 ......
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