响应面Box—Behnken设计优化超声提取桑椹多酚条件(1)
【摘要】 目的：利用响应面Box-Behnken设计优化超声提取桑椹多酚工艺条件。方法：选择乙醇浓度、桑椹粉碎度、料液比、提取时间4个因素进行单因素考察，在此基础上，用响应面Box-Behnken设计对影响较大的单因素进行3因素3水平响应面分析，以确定最佳提取条件。结果：桑椹多酚类化合物的最佳提取工艺为乙醇浓度为44.6%、桑椹粉碎度为120目、料液比为1∶34(g/ml)。结论：响应面Box-Behnken设计能优化超声提取桑椹多酚提取条件，提高桑椹多酚提取得率。
【关键词】 响应面法；Box-Behnken设计；超声提取；桑椹多酚
【中图分类号】R284.2【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517(2015)10-0025-03
Optimization of the parameters on extraction of Polyphenol from Mori Fructus with ultrasonic wave technology by Box-Behnken design-response surface method
, 百拇医药
WEI Liwen1CHEN Zhenjian2
1.Guangxi university of Chinese medicine，Guangxi Nanning 530001；2. The pepole′s hospital of Guangxi Lingshan county，Guangxi Lingshan 535400
Abstract：Objective To optimize ultrasonic extraction technology process conditions of polyphenol from Mori Fructus by the response surface method. Method Base on ethanol concentration， comminution degree， the liquid-solid ratio， ultrasonic time of single factor experiment， the BoxBehnken design for 3 star factor 3 level response surface methodology was applied， to ascertain the best extraction condition. Results The ethanol concentration of 44.6%， comminution degree of 120 section and liquid-solid ratio of 34.1∶1 were selected as the optimum conditions. Conclusion Box-Behnken design of response surface methodology was applied to optimize ultrasonic extraction technology process conditions of polyphenol from Mori Fructus
, 百拇医药
Keywords：the response surface method；Box-Behnken；ultrasonic extraction； polyphenol of Mori Fructus
桑椹Mori Fructus为桑科植物桑(Morus alba L.)的果实，为药食两用之佳品，具有滋阴补血、生津润燥的功效，用于肝肾阴虚、眩晕耳鸣、心悸失眠、须发早白、津伤口渴、内热消渴、肠燥便秘[1]。《本草纲目》记载“椹有乌、白二种”。《四时月令》云“四月宜饮桑椹酒，能理百种风热。”《本草新编》有云“四月采桑椹数斗，饭锅蒸熟晒干即可为末”。多酚广泛存在于植物体中，也是桑椹中的主要成分，其主要包括黄酮类、棓酸类及黄烷醇类等，具有抗氧化、抗菌、防癌抗癌等作用[2-4]。超声广泛用于有效成分提取，其可加速成分进入溶剂，保持被浸提的生物活性物质在短时间内保持不变，极大提高提取效率[5]。Box-Behnken设计是用来评价因素指标和因素间非线性关系的一种试验设计方法，具有试验次数相对较少，评价准确的优点，广泛用于中药有效成分的提取条件优化。本文在单因素实验的基础上，运用响应面Box-Behnken设计优化超声提取桑椹多酚条件，为今后桑椹多酚资源更好地利用垫定了基础。
, http://www.100md.com
1仪器与材料
1.1仪器粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司)；鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)；岛津UV-1800紫外分光光度计；Elmasonic P300H超声清洗器；梅特勒-托利多电子分析天平。
1.2试剂与材料桑椹采于广西蚕业推广总站，经广西蚕业技术推广总站朱方容研究院鉴定为桑科植物广东桑Morus atropurpurea Roxb.的果穗。没食子酸(天津市光复精细化工研究所)、乙醇(国药集团化学试剂有限公司)、Na2CO3(天津博迪化工股份有限公司)、福林酚试剂(上海荔达生物科技有限公司)均为分析纯。
2方法
2.1桑椹药材处理将采回的桑椹用沸水蒸1min后置于鼓风干燥箱，55℃烘干，打粉，过筛。
2.2桑椹多酚测定方法桑椹多酚测定方法参照李巨秀[6]多酚测定方法，在此基础上稍作改进。
2.2.1没食子酸标准溶液配制取没食子酸标准品适量，精密称定为0.0020g，用纯水溶解并定溶于100ml容量瓶，得质量分数为20mg/L的对照品标准液。
2.2.2最佳测定波长的确定用移液枪吸取1.0ml的没食子酸标准溶液和桑椹多酚提取液分别置于10ml的容量瓶中，分别加入1mol/l 福林酚试剂1ml，混匀，加入2ml质量浓度为0.15g/ml Na2CO3溶液，充分混匀后定容，室温避光放置80min后进行紫外全波长(200～800)光谱扫描，并设试剂空白对照，最终确定760nm为最大吸收波长。, 百拇医药(韦丽文陈振建)
【关键词】 响应面法；Box-Behnken设计；超声提取；桑椹多酚
【中图分类号】R284.2【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517(2015)10-0025-03
Optimization of the parameters on extraction of Polyphenol from Mori Fructus with ultrasonic wave technology by Box-Behnken design-response surface method
, 百拇医药
WEI Liwen1CHEN Zhenjian2
1.Guangxi university of Chinese medicine，Guangxi Nanning 530001；2. The pepole′s hospital of Guangxi Lingshan county，Guangxi Lingshan 535400
Abstract：Objective To optimize ultrasonic extraction technology process conditions of polyphenol from Mori Fructus by the response surface method. Method Base on ethanol concentration， comminution degree， the liquid-solid ratio， ultrasonic time of single factor experiment， the BoxBehnken design for 3 star factor 3 level response surface methodology was applied， to ascertain the best extraction condition. Results The ethanol concentration of 44.6%， comminution degree of 120 section and liquid-solid ratio of 34.1∶1 were selected as the optimum conditions. Conclusion Box-Behnken design of response surface methodology was applied to optimize ultrasonic extraction technology process conditions of polyphenol from Mori Fructus
, 百拇医药
Keywords：the response surface method；Box-Behnken；ultrasonic extraction； polyphenol of Mori Fructus
桑椹Mori Fructus为桑科植物桑(Morus alba L.)的果实，为药食两用之佳品，具有滋阴补血、生津润燥的功效，用于肝肾阴虚、眩晕耳鸣、心悸失眠、须发早白、津伤口渴、内热消渴、肠燥便秘[1]。《本草纲目》记载“椹有乌、白二种”。《四时月令》云“四月宜饮桑椹酒，能理百种风热。”《本草新编》有云“四月采桑椹数斗，饭锅蒸熟晒干即可为末”。多酚广泛存在于植物体中，也是桑椹中的主要成分，其主要包括黄酮类、棓酸类及黄烷醇类等，具有抗氧化、抗菌、防癌抗癌等作用[2-4]。超声广泛用于有效成分提取，其可加速成分进入溶剂，保持被浸提的生物活性物质在短时间内保持不变，极大提高提取效率[5]。Box-Behnken设计是用来评价因素指标和因素间非线性关系的一种试验设计方法，具有试验次数相对较少，评价准确的优点，广泛用于中药有效成分的提取条件优化。本文在单因素实验的基础上，运用响应面Box-Behnken设计优化超声提取桑椹多酚条件，为今后桑椹多酚资源更好地利用垫定了基础。
, http://www.100md.com
1仪器与材料
1.1仪器粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司)；鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)；岛津UV-1800紫外分光光度计；Elmasonic P300H超声清洗器；梅特勒-托利多电子分析天平。
1.2试剂与材料桑椹采于广西蚕业推广总站，经广西蚕业技术推广总站朱方容研究院鉴定为桑科植物广东桑Morus atropurpurea Roxb.的果穗。没食子酸(天津市光复精细化工研究所)、乙醇(国药集团化学试剂有限公司)、Na2CO3(天津博迪化工股份有限公司)、福林酚试剂(上海荔达生物科技有限公司)均为分析纯。
2方法
2.1桑椹药材处理将采回的桑椹用沸水蒸1min后置于鼓风干燥箱，55℃烘干，打粉，过筛。
2.2桑椹多酚测定方法桑椹多酚测定方法参照李巨秀[6]多酚测定方法，在此基础上稍作改进。
2.2.1没食子酸标准溶液配制取没食子酸标准品适量，精密称定为0.0020g，用纯水溶解并定溶于100ml容量瓶，得质量分数为20mg/L的对照品标准液。
2.2.2最佳测定波长的确定用移液枪吸取1.0ml的没食子酸标准溶液和桑椹多酚提取液分别置于10ml的容量瓶中，分别加入1mol/l 福林酚试剂1ml，混匀，加入2ml质量浓度为0.15g/ml Na2CO3溶液，充分混匀后定容，室温避光放置80min后进行紫外全波长(200～800)光谱扫描，并设试剂空白对照，最终确定760nm为最大吸收波长。, 百拇医药(韦丽文陈振建)