23色谱条件[6]色谱柱：Kromasil C18(250mm×46mm，5μm)；流速：100ml/min；柱温：40℃；检测波长：230nm；流动相：100mmol/L醋酸铵缓冲液-甲醇(42∶58)；进样量：20μl。

    24分组与给药[7]体外孵化反应分为阳性对照组、阴性对照组和试药组。阴性对照组中加入磷酸盐缓冲液(pH74)，阳性对照组中加入酮康唑溶液(00125、0025、005、01、05、1、10、50μmol/l)；试药组给予以磷酸盐缓冲液(pH74)稀释的不同浓度的中成药溶液。孵育体系总体积均为200μl，根据“22孵育体系与样品处理”项下进行反应并处理。将所有样品按“23色谱条件”项下进行测定，根据代谢产物1-羟基咪达唑仑的生成率可确定 CYP3A4 酶的相对活性(即试药组占阴性对照组生成率的百分比)，计算半数抑制率(IC50)。

    25标准曲线的制备取6只EP管，加入1-羟基咪达唑仑储备液，使1-羟基咪达唑仑的终浓度分别为10、20、50、100、200、500、1000ng/ml ......