丹绿补肾胶囊质量控制方法研究(1)
【摘 要】 目的：建立丹绿补肾胶囊质量控制方法。方法：采用薄层色谱法(TLC)对丹绿补肾胶囊中白花丹、绿包藤、射干及胡椒药材进行定性鉴别;采用高效液相色谱法(HPLC)，以次野鸢尾黄素作为指标成分进行定量测定。结果：薄层色谱法能清晰地鉴别丹绿补肾胶囊中的白花丹、绿包藤、射干及胡椒，阴性无干扰，专属性强;次野鸢尾黄素在1.097～32.91μg/mL(r2=0.9999)质量浓度范围内与峰面积具有良好的线性关系;平均回收率(n=9)为100.6%，RSD为1.28%。结论：所建立的方法准确、可靠、专属性强， 可作为丹绿补肾胶囊的质量控制方法。
【关键词】 丹绿补肾胶囊;质量控制;薄层色谱;高效液相色谱;次野鸢尾黄素
【中图分类号】R284 【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517(2019)1-0023-04
Abstract：Objective To establish the method of quality control of Danlv Bushen Capsules. Methods Plumbago zeylanica L.，Tinospora crispa (Linn.) Hook. f.& Thoms.， Belamcanda chinensis (L.) DC， Piper nigrum L.in Danlv Bushen Capsules. were identified by TLC，and Irisflorentin as index components was determined by HPLC.Results Danlv Bushen Capsules could be detected by TLC， The linearity ranges obtained from the calibration curves of Irisflorentin was 1.097～32.91μg/mL (r2=0.9999). The average recoveries of Irisflorentin was 100.6% (n=9) and RSD was 1.28%. Conclusion This method is simple， accurate， selective and highly reproducible. It can be used for the quality control of Danlv Bushen Capsules.
Keywords： Danlv Bushen Capsules;Quality Control; TLC;HPLC; Irisflorentin
丹绿补肾胶囊是由白花丹、绿包藤、射干、胡椒和干姜五味药组成的(傣药)复方制剂，主要功效为补肾滋阴壮阳。用于阴阳两虚所致阳痿遗精、腰膝酸软和身体乏力[1]。现行国家标准为国家食品药品监督管理局局颁药品标准WS-10436(ZD-0436[BF])-[BFQ]2002-2012Z，其中鉴别项下包括白花丹、绿包藤、胡椒的薄层鉴别;含量项下包括胡椒碱含量测定。本次研究重新建立了丹绿补肾胶囊的薄层鉴别方法，增加射干薄层鉴别[2-6]，修订了白花丹、绿包藤及胡椒薄层鉴别方法。且以上4个药材的薄层鉴别采用同一供试品溶液即可完成;同时采用高效液相色谱法，增加次野鸢尾黄素的含量。实验结果表明所用方法操作简便、专属性好、灵敏度高、快捷准确，可用于该制剂的质量控制，并且可完善和提高丹绿补肾胶囊的质量标准。
1 仪器与试药
1.1 仪器 KH3200E型超声波清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司);CPA225D型电子分析天平(德国赛多利斯);HH-2型电热恒温水浴锅(北京科伟永兴仪器有限公司);TDL-60B型台式离心机(上海安亭科学仪器厂);国产薄层预制G板(青岛海洋化工厂分厂);国产薄层预制GF254板(青岛海洋化工厂分厂);瑞士CAMAG REPROSTAR 3薄层色谱数码相机成像系统;安捷伦1260高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)。
1.2 试药 次野鸢尾黄素对照品(批號：111557-200602)、胡椒碱对照品(批号：110775-201405，纯度98.9 %)、白花丹对照药材(批号：121370-200401)、绿包藤对照药材(批号：121371-200401)、射干对照药材(批号：120994-201206)均购自中国食品药品检定研究院;丹绿补肾胶囊(批号：17041761、17041861、1704196，1云南神威施普瑞药业有限公司);各阴性对照样品根据处方及制法自制，所用试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 薄层鉴别
2.1.1 白花丹的薄层色谱鉴别 取本品内容物1g，加甲醇5mL，超声提取30min，过滤，滤液作为供试品溶液。另取白花丹对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2015年版四部 通则0502)试验，吸取上述两种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(30～60℃)-三氯甲烷-甲醇(8∶4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铝乙醇溶液，105℃加热2min，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。白花丹阴性对照无干扰，方法具专属性。如图1所示。·
2.1.2 绿包藤的薄层色谱鉴别 取绿包藤对照药材1g，加甲醇5mL，超声处理30min，滤过，滤液作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2015年版四部 通则0502)试验，吸取鉴别(1)项下的供试品溶液5μL、上述对照药材溶液10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(8∶5∶1.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钼酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。绿包藤阴性对照无干扰，方法具专属性。如图2所示。, http://www.100md.com(张岩岩 周永妍 王文鹏)
【关键词】 丹绿补肾胶囊;质量控制;薄层色谱;高效液相色谱;次野鸢尾黄素
【中图分类号】R284 【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517(2019)1-0023-04
Abstract：Objective To establish the method of quality control of Danlv Bushen Capsules. Methods Plumbago zeylanica L.，Tinospora crispa (Linn.) Hook. f.& Thoms.， Belamcanda chinensis (L.) DC， Piper nigrum L.in Danlv Bushen Capsules. were identified by TLC，and Irisflorentin as index components was determined by HPLC.Results Danlv Bushen Capsules could be detected by TLC， The linearity ranges obtained from the calibration curves of Irisflorentin was 1.097～32.91μg/mL (r2=0.9999). The average recoveries of Irisflorentin was 100.6% (n=9) and RSD was 1.28%. Conclusion This method is simple， accurate， selective and highly reproducible. It can be used for the quality control of Danlv Bushen Capsules.
Keywords： Danlv Bushen Capsules;Quality Control; TLC;HPLC; Irisflorentin
丹绿补肾胶囊是由白花丹、绿包藤、射干、胡椒和干姜五味药组成的(傣药)复方制剂，主要功效为补肾滋阴壮阳。用于阴阳两虚所致阳痿遗精、腰膝酸软和身体乏力[1]。现行国家标准为国家食品药品监督管理局局颁药品标准WS-10436(ZD-0436[BF])-[BFQ]2002-2012Z，其中鉴别项下包括白花丹、绿包藤、胡椒的薄层鉴别;含量项下包括胡椒碱含量测定。本次研究重新建立了丹绿补肾胶囊的薄层鉴别方法，增加射干薄层鉴别[2-6]，修订了白花丹、绿包藤及胡椒薄层鉴别方法。且以上4个药材的薄层鉴别采用同一供试品溶液即可完成;同时采用高效液相色谱法，增加次野鸢尾黄素的含量。实验结果表明所用方法操作简便、专属性好、灵敏度高、快捷准确，可用于该制剂的质量控制，并且可完善和提高丹绿补肾胶囊的质量标准。
1 仪器与试药
1.1 仪器 KH3200E型超声波清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司);CPA225D型电子分析天平(德国赛多利斯);HH-2型电热恒温水浴锅(北京科伟永兴仪器有限公司);TDL-60B型台式离心机(上海安亭科学仪器厂);国产薄层预制G板(青岛海洋化工厂分厂);国产薄层预制GF254板(青岛海洋化工厂分厂);瑞士CAMAG REPROSTAR 3薄层色谱数码相机成像系统;安捷伦1260高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)。
1.2 试药 次野鸢尾黄素对照品(批號：111557-200602)、胡椒碱对照品(批号：110775-201405，纯度98.9 %)、白花丹对照药材(批号：121370-200401)、绿包藤对照药材(批号：121371-200401)、射干对照药材(批号：120994-201206)均购自中国食品药品检定研究院;丹绿补肾胶囊(批号：17041761、17041861、1704196，1云南神威施普瑞药业有限公司);各阴性对照样品根据处方及制法自制，所用试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 薄层鉴别
2.1.1 白花丹的薄层色谱鉴别 取本品内容物1g，加甲醇5mL，超声提取30min，过滤，滤液作为供试品溶液。另取白花丹对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2015年版四部 通则0502)试验，吸取上述两种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(30～60℃)-三氯甲烷-甲醇(8∶4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铝乙醇溶液，105℃加热2min，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。白花丹阴性对照无干扰，方法具专属性。如图1所示。·
2.1.2 绿包藤的薄层色谱鉴别 取绿包藤对照药材1g，加甲醇5mL，超声处理30min，滤过，滤液作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2015年版四部 通则0502)试验，吸取鉴别(1)项下的供试品溶液5μL、上述对照药材溶液10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(8∶5∶1.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%磷钼酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。绿包藤阴性对照无干扰，方法具专属性。如图2所示。, http://www.100md.com(张岩岩 周永妍 王文鹏)