二氢杨梅素对肝纤维化大鼠肝功能及肝纤维化指标的影响(2)
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1.4检测指标造模13周后大鼠处死前禁食12小时，称重后经腹腔注射10%水合氯醛溶液麻醉并固定，体外心脏采血6ml，分离血清于-20℃冰箱保存。全自动生化分析仪检测血清ALT、AST；放射免疫法测定血清HA、LN、PCⅢ、CⅣ。
1.5统计学方法实验数据采用SPSS13.0软件处理，以均数±标准差(±s)表示，采用单因素方差分析，组间比较采用LSD-t检验，以P<0.05表示差异有统计学意义。
2结果
2.1各组大鼠一般情况正常组大鼠一般状态良好，毛发整齐有光泽，活动如常，饮食正常，体重增长正常；模型组大鼠随着时间的延长，CCL4注射量的增加，活动逐渐减少，变得好斗易怒，毛发蓬乱脱落且光泽暗淡，精神萎靡，摄食减少，体重增长缓慢；复方鳖甲治疗对照组大鼠精神、活动、毛色、饮食体重等都较模型组好；而二氢杨梅素干预组随着给药天数的增加，模型组的大鼠症状也逐渐得到改善，其中高剂量组的改变尤为明显，情况接近于复方鳖甲治疗组。至实验结束时，模型组、复方鳖甲组及二氢杨梅素低、中、高剂量治疗组大鼠分别死亡5、2、3、4、2只，正常组大鼠无死亡。
2.2各组大鼠血清ALT和AST的检测结果见表1。
2.3各组大鼠血清HA、LN、PC-Ⅲ、CⅣ的检测结果表2。
3讨论
血清学的检测是反映肝纤维化程度的重要指标。常用的血清肝纤维化指标有HA、LN、IPC-III、ⅣC等。HA主要由肝脏内皮细胞摄取分解，慢性肝病时，HA随着肝纤维化的加重或好转而升降，血窦内皮细胞功能低下时HA升高更为明显。研究认为，HA可以反映肝脏的损伤程度和肝纤维化的发展变化，是诊断慢性病毒性肝炎及酒精性肝病临床实用价值最高的一个指标。LN属非胶原蛋白类，是基底膜的主要成分，慢性肝病时，肝脏内皮细胞和星状细胞合成LN增加，且血清中LN随肝纤维化程度的加重而升高。PC-III为反映肝脏纤维增生的指标，它与肝纤维程度呈正相关。肝纤维化时，肝内主要为前胶原蛋白合成和沉积增加，血清PCPC-III能可靠地反映肝纤维化的活动程度，同时与肝脏炎症、坏死有关，其水平随肝纤维化程度的加重而升高。ⅣC是基底膜骨架的主要胶原成分，在肝脏内合成和代谢，在慢性肝纤维化的发展过程中，肝组织ⅣC过量合成，出现毛细血管化，使血液中的ⅣC含量异常增多，与肝纤维化程度密切相关。但上述肝纤维化指标为非肝脏特异性，它们只是反映胶原的代谢情况，并不能反映胶原沉积的多少，且受到肝外组织炎症、肝窦内皮功能、胆道排泌功能等的影响。联合多种指标进行检测，有望提高肝纤维化诊断的准确性。本实验联合测定血清ALT、AST、HA、LN、PC-III、ⅣC等指标，能较好地反映肝组织损伤、修复、肝纤化程度。我们的实验表明，二氢杨梅素各剂量组的ALT、AST水平较模型组有明显下降，能较好地改善肝功能，说明二氢杨梅素有显著的保肝护肝作用；同时二氢杨梅素能明显降低肝纤维化时升高的HA、LN、PC-III、ⅣC，提示二氢杨梅素有较好的治疗肝纤维化作用，且随着剂量的增加，该作用得到加强，在一定范围内具有剂量相关性。
参考文献
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