天麻多糖的纯化工艺研究
酶法,凝胶,1原材料,试剂,2试验方法,3结果与讨论,4结论
朱晓霞 张 勇西南科技大学材料科学与工程学院,四川 绵阳 621010
天麻多糖的纯化工艺研究
朱晓霞 张 勇
西南科技大学材料科学与工程学院,四川 绵阳 621010
对本实验室提取的川产天麻多糖粗提液进行分离纯化,研究结果表明:采用酶法除蛋白效果比较理想,一次就能达到比较好的效果,胰蛋白酶用量为2.0U/mg,处理时间以5h最好;酶解结合一次Sevag法再醇沉后,蛋白脱出率为90.1%;进样体积8ml、样品浓度4%、流速0.8ml/min时,Sepharose 6 Fast Flow凝胶分离效果最好。
天麻;多糖;纯化
糖类物质是地球上数量最多的一类有机化合物,可广泛应用于医药、保健品及功能食品,作为绿色生物医药产品具有广阔的市场前景[1]。目前多糖产品开发相当热门,也卓有成效。多糖的生理功能与其纯度和化学结构有着重要的关系,多糖的提取纯化是其研究的基础。活性多糖的分离纯化是指获得粗的活性多糖提取液后,除去共存杂质,进行混合糖的相互分离。微生物多糖去蛋白常采用Seveag法、三氟三氯乙烷法;植物多糖去蛋白[2]常用三氯乙酸法,也可以用蛋白质水解酶使样品中的蛋白质部分降解后,再用Seveage法效果会更好。多糖的分离一般主要有分级沉淀、季铵盐沉淀法、透析法、金属盐沉淀法和制备性区域电泳等,但目前大多采用DEAE-凝胶(二甲氨基乙基凝胶)或其他各种不同类型的凝胶柱层析以及离子交换色谱法[3],根据文献和考虑到多糖的性质,宜采用凝胶柱层析技术进行分离。本文对天麻多糖纯化进行了详细研究。
1 原材料、试剂
本实验室所得未经醇沉的天麻多糖粗提液[4];乙醇、氯仿、正丁醇均为成都市科龙化工试剂厂出品(分析纯AR);凝胶Sepharose 6 Fast Flow、Sephacryl-S300均为Amersham公司出品;牛血清白蛋白(中国医药上海化学试剂公司生产) ......
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