盐酸四环素缓释微球对成骨细胞增殖作用的研究
培养箱,1实验部分,2讨论
张 珏 邓媛媛 曾富佳遵义医药高等专科学校,贵州 遵义 563000
四环素及其无抗生素作用的化学异构衍生物 (CMTs)具有特殊的药理活性:抑制基质金属蛋白酶 (MMPs)、抑制骨吸收、恢复成骨细胞结构和功能等[1,2],这些性质在骨科具有潜在临床应用价值。前期研究证实低浓度盐酸四环素,可促进体外培养的人胚成骨细胞活性及增殖,增加和加强细胞合成I型胶原、骨钙素等促进骨生成的物质[3],提示盐酸四环素有较强促成骨潜能。而利用缓释系统控制盐酸四环素在组织中持续稳定的缓慢释放,更能满足骨愈合再生生理学规律的要求。本实验旨在通过对制备的盐酸四环素缓释微球[4]用于成骨细胞增殖作用的研究,确定盐酸四环素缓释微球潜在的应用价值。
1 实验部分
1.1 材料和仪器 3~7d龄健康SD大鼠10只,雌雄不限,体重20~30g(四川大学实验动物中心提供);盐酸四环素缓释微球;胎牛血清 (FBS,美国Gibco);DMEM培养基(美国Gibco);Ⅰ型胶原酶 (美国Sigma);胰蛋白酶 (美国Gibco);二甲亚砜 (DMSO,美国Sigma);MTT(美国Sigma);倒置相差显微镜 (日本Olympus);离心机 (德国eppendorf公司);CO2细胞培养箱 (德国Thermo公司);细胞超净工作台 (德国Thermo);连续光谱测读仪 (美国Bio-Rad)。
1.2 方法和结果
1.2.1 SD大鼠成骨细胞分离培养及鉴定 在无菌条件下剪取10只3~7d龄SD大鼠颅顶骨,用无菌PBS冲洗 ......
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