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编号:12710131
黄芪甲苷对急性肺损伤大鼠内质网应激介导影响(2)
http://www.100md.com 2014年4月15日 张吉 臧东钰
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    参见附件。

     1 材料与方法

    1.1 实验动物及试剂 50只SD大鼠250~300g,雌雄不拘,由辽宁医学院实验动物中心提供。主要试剂有黄芪甲苷(上海源叶生物科技有限公司,经高效液相色谱法鉴定纯度为98%,批号:CM0308QA13),内毒素LPS(美国Sigma公司,批号:L2880),组织蛋白提取试剂盒(南京碧云天公司,批号:P0013B),葡萄糖调节蛋白78(GRP78 ,批号:ab21685)、C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP,批号:ab11419)和β-actin(美国Santa Cruz公司,批号:sc-47778),其他均为国产分析纯试剂。

    1.2 动物分组及模型制备 50只健康SD大鼠随机分成5组,每组10只。对照组(静注生理盐水1mg/kg),ALI组(静注LPS,5mg/kg),ASIV高、中、低剂量组(注射LPS前,给药3、6、12mg/kg ASIV连续灌胃7d)。各组动物取样前禁食12h,20%乌拉坦(12g/kg)腹腔注射麻醉。开胸取右前叶组织做湿干重(W/D)测定;取右肺副叶、后叶置于生理盐水中迅速漂洗干净后,立即放入液氮中冷冻,后转入-80℃冰箱内保存,用作western blotting检测。

    1.3 指标测定

    1.3.1 肺组织作湿干重(W/D)测定 取右前叶组织测定湿重量(wet weight,W)后,至干燥箱(80℃,24h)烤至恒重,测干质量(dry weight ......

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