李润琴 黄 春

    重庆三峡医药高等专科学校，重庆 404020

    全世界每年失代偿心衰治疗花费高达1200亿美元，5年死亡率50%左右。心肌梗死是全球致死和致残的主要疾病之一。以2011年为例，中国有50～60万急性心肌梗死患者。β-阻滞剂、ACEI和醛固酮受体拮抗剂等药物旨在减少心肌缺血损伤;心脏同步化治疗以及辅助装置等旨在减少心衰死亡率，改善患者生活质量;对于心衰患者，心脏的再生治疗才能保留正常心肌功能。迄今心脏移植才是唯一有效治疗手段。然而，全球心脏移植供体短缺是巨大障碍。随着新的治疗手段的探索，10年前多能干细胞已经应用于心脏再生治疗。近期，科学家们发现了人的心脏中有可分化为所有主要心脏细胞的干细胞，心肌损伤的患者在损伤的心肌处注射体外培养的心肌干细胞，可以治疗缺血性心肌病。该发现为自体细胞用于受损心脏的治疗开辟了一条新的道路。目前干细胞移植正处于技术瓶颈阶段，干细胞移植的效果在多数研究中基本上得到了肯定，但是还存在许多急待解决的问题，如干细胞治疗各种疾病的确切机制、移植后的远期效果等尚不清楚。本课题做为此研究方向的基础性工作，致力于建立一种简单有效的、重复性好的，对具有心肌干细胞蛋白表达特性的心肌细胞的分离培养的方法。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物 性成熟SD大鼠 (1只雄鼠、1只雌鼠)购自重庆医科大学实验动物中心。饲养2周，产7只新生大鼠，取24小时之内新生大鼠实验。

    1.1.2 试剂 cTnT、GATA4抗体购自santa cruz公司。低糖DMEM、胎牛血清、Trypsin-EDTA和PBS培养基购自Gibco公司 ......