侯杰 杨镛

    昆明医学院第四附属医院云南省血管外科中心基础研究室，云南 昆明 650021

    近年来，随着对肿瘤发生机制研究的不断深入，越来越多的研究支持肿瘤是一种干细胞疾病的理论，即肿瘤干细胞理论。这种理论为肿瘤干细胞是肿瘤细胞中一小部分具有干细胞性质的细胞群体，具有自我更新、无限增殖能力和不定向分化潜能，是形成不同分化程度的肿瘤细胞以及肿瘤不断扩展的源泉[1]。笔者就胃癌肿瘤干细胞的提取分离、各种表面标记物在胃癌肿瘤干细胞、癌前病变中的表达、以及各种表面标记物与胃癌复发转移及治疗间的关系进行综述。

    1 肿瘤干细胞的提取、分离

    2003 年，Clarke[1，2]等首次利用流式细胞仪从乳腺癌中分离培养出表达CD44+(黏附分子)、B38-1(乳腺/卵巢特异性标记)和ESA(上皮细胞特异性抗原)的肿瘤干细胞。目前国内外选用的分离、筛选肿瘤干细胞的技术主要有荧光活化细胞分选术 (fluorescence activcited cell sorting，FACS，也称流式细胞术)和磁性活化细胞分选术 (magnetic activated cell sorting，MACS)。

    1.1 流式细胞术 流式细胞分选系统是较常用的分离肿瘤干细胞的方法，它能够一次性进行多标志分选，而且能够选择荧光强度大的肿瘤细胞，分选纯度高，特异性强，但需要具备有分选功能的流式细胞仪，并且无菌操作过程相对繁琐[3]。

    1.2 磁性活化细胞分选术 磁性活化细胞分选的原理是利用未标记的CD抗原等蛋白的单克隆抗体作为第一抗体与单细胞悬液孵育后，再用免疫磁珠 (micro-beads)标记的第二抗体结合，这种特异性一抗、二抗标记的细胞悬液流过特制的永久磁铁的磁场时，可吸附在磁式分选柱内，再将磁式分选柱移开磁场从柱内洗脱、收集干细胞。磁性活化细胞分选术需要的设备简单，能够在超净台中操作，但进行多标志分选时需要分步进行。

    2 目前发现的表面标志物在胃癌肿瘤干细胞中的表达

    2.1 CD44与胃癌干细胞的关系 胃癌干细胞的标志物的研究起步较晚，目前集中在CD44+、CD24+、CD133+以及上皮细胞粘附分子 (Epithelial cell adhesion molecule，Ep-CAM)等方面。2003 年，Clarke[1，2]等首次利用流式细胞仪从乳腺癌中分离培养出表达CD44+(黏附分子)、B38-1(乳腺/卵巢特异性标记)和ESA(上皮细胞特异性抗原)的干细胞，他们将这种含CD44+的细胞注入正常小鼠体内 ......