李 静 王定雪

    1.贵阳中医学院实验中心，贵州 贵阳 550002;2.贵阳中医学院第一附属医院，贵州 贵阳 550002

    三种除蛋白方法对复方乙肝宁多糖及蛋白的影响

    李 静1王定雪2

    1.贵阳中医学院实验中心，贵州 贵阳 550002;2.贵阳中医学院第一附属医院，贵州 贵阳 550002

    目的：对乙肝宁复方多糖进行三种除蛋白处理，考查除蛋白效果。方法：采用苯酚-硫酸法在490 nm处测定糖的含量，以多糖回收率和蛋白去除率为指标。结果：Sevag法、5%三氯乙酸法、三氯乙酸-正丁醇法的多糖回收率分别为57.41%、88.27%、64.90%，蛋白去除率分别为53.06%、20.23%、28.90%。结论：5%三氯乙酸法对多糖的保留效果最好，Sevag法除蛋白效果最好，本实验为多糖除蛋白的方法提供了实验依据。

    乙肝宁复方；多糖；苯酚-硫酸法；除蛋白

    目前公认的多糖物质是主要吸湿性成分之一，所以首先对乙肝宁颗粒复方水提液中的多糖进行探讨。乙肝宁颗粒[1]是《中国药典》2010年版(Ⅰ部)收载的成方制剂，具有补气健脾、活血化瘀、清热解毒的作用，主要用于慢性迁延性肝炎、慢性活动性肝炎属湿热内蕴、肝郁脾虚、气虚血瘀证者，对急性肝炎也有一定疗效。多糖是乙肝宁颗粒的主要有效成分之一，具有多种生理活性，但由于多糖和蛋白质结合紧密，采用传统水提醇沉法得到的沉淀主要是多糖和蛋白质的混合物，为了最大限度地保留多糖和去除蛋白质，本实验采用苯酚-硫酸法测定乙肝宁复方多糖的含量，对比Sevag法、5%三氯乙酸法、三氯乙酸-正丁醇法的多糖回收率和蛋白质去除率。

    1 仪器与试剂

    1.1 仪器 SP-756可见分光度计(上海光谱仪器有限公司)；AR124CN电子天平(奥豪斯仪器有限公司)；RE52-99型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)；SHZ-D(Ⅲ)型循环水多用真空泵(巩义予华仪器有限责任公司)；HH-S型水浴锅(郑州长城科工贸有限公司)；低速离心机；DZF-6050真空干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)。

    1.2 试剂 苯酚(AR，湖南汇虹试剂有限公司，20090824)；硫酸(AR，湖南省株洲市化学工业研究所)；葡萄糖(AR，天津市科密欧化学试剂有限公司，20101023)；乙醇(AR，湖南汇虹试剂有限公司，20110521)；三氯乙酸(AR，天津市科密欧化学试剂有限公司 ......