HPLC同时测定清火胶囊中5种成分的含量(2)
2.4 系统适用性试验 分别取混合对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液注入色谱仪,色谱图见图1。在该色谱条件下,靛玉红、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素和大黄酚与相邻组分峰的分离度均大于1.5,理论板数按靛玉红峰计不低于2500,阴性样品在与对照品色谱峰相应的位置上无吸收峰,表明处方中的其他成分对测定结果无影响。2.5 线性关系的考察 精密称取靛玉红、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素和大黄酚对照品适量,以甲醇为溶剂,分别配制成对照品贮备溶液(即含靛玉红0.4996mg/ml、芦荟大黄素0.3910mg/ml、大黄酸0.3480mg/ml、大黄素0.2156mg/ml、大黄酚0.2119mg/ml的溶液)倍比稀释法配置成系列质量浓度的溶液。进样10μl,测定各组分峰面积。以各组分浓度(C)横坐标,相应峰面积(A)为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程。靛玉红: A=91.267 C+9.9152,r=0.9999,线性范围:0.050~5.00μg/ml;芦荟大黄素:A=38.850C-6.6232,r=0.9999,线性范围:0.391~39.1μg/ml;大黄酸:A=121.823C-12.269,r=0.9997,线性范围:0.696~69.6μg/ml;大黄素:A=83.911C-3.6159 ......
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