王艳华 段佳林 卫国 朱艳荣 殷 英 郭 超 关 月 奚苗苗 文爱东 翁 琰

    第四军医大学第一附属医院药剂科，陕西 西安 710032

    药物研究

    脂溶性蟾毒配基的纯化工艺研究

    王艳华 段佳林 卫国 朱艳荣 殷 英 郭 超 关 月 奚苗苗 文爱东 翁 琰*

    第四军医大学第一附属医院药剂科，陕西 西安 710032

    目的：研究从蟾酥中提取分离高纯度蟾毒灵 (B)、华蟾酥毒基 (C)和脂蟾毒配基 (R)的纯化工艺条件。方法：以三种蟾毒配基的总含量和转移率为考察指标，采用单因素考察法，结合蟾酥药材的特点、化学成分及工艺成本等多方面的综合因素，考察蟾酥药材的提取、萃取及硅胶柱层析分离的具体工艺条件及参数。结果：蟾酥药材经10倍量(v/m)80%乙醇加热回流1h，再用10倍量 (v/m)乙酸乙酯萃取3次，最后用硅胶柱层析进行分离后，三种蟾毒配基的总含量可达92.26%，总转移率为80.54%。结论：此法能很好地从蟾酥中分离纯化蟾毒配基，大大提高了三个蟾毒配基的纯度。

    蟾毒配基；含量；转移率；提取；萃取；硅胶柱层析

    蟾酥是我国的传统中药材，由蟾蜍科动物中华大蟾蜍 (Bufo bufo gargarzinas Gantor)或黑眶蟾蜍(Bufo melanostictus Schneider)的皮肤腺及耳后腺分泌的白色浆液加工干燥而成[1]，具有兴奋呼吸、致幻、镇痛、强心、升压、抗休克、局部麻醉、镇咳、抗肿瘤等一系列的药理活性[2]，其化学成分按溶解性能不同分为脂溶性和水溶性两大类。虽然脂溶性成分仅占20%左右，但在发挥药理活性方面却起主导作用，其中又以蟾毒灵 (bufalin，B)、华蟾酥毒基 (cinobufagin，C)和脂蟾毒配基 (resibufogenin，R)含量较多、活性较强，且具有高效低毒的特点。目前蟾酥的提取工艺研究报道很多[3-6]，但对蟾毒灵、华蟾酥毒基和脂蟾毒配基进行提取和纯化并提高三种蟾毒配基混合物纯度的研究并不多。研究以三种蟾毒配基的总含量和转移率为考察指标，采用单因素试验系统研究了蟾酥的提取纯化工艺，旨在得到高纯度的三种蟾毒配基混合物，为工业化生产提供了一定的参考。

    1 仪器与试药

    1.1 仪器 日立 D-7000高效液相色谱仪(L-7100泵、L-7420紫外检测器、L-7200自动进样器，日本Hitachi公司)；HiQ sil C18色谱柱 (250 mm×4.6mm，5μm，日本KYATECH公司)；AT-130柱温箱 (天 津 市 鑫 洲 科 技有 限 公 司)；FA1104N电子分析天平 (上海民桥精密科学仪器有限公司)；DF-101S集热式恒温磁力搅拌器(巩义市英峪予华仪器厂)；FW-100高速万能粉碎机 (天津市泰斯特仪器有限公司)；DZ-1BC真空干燥箱(天津市泰斯特仪器有限公司)；玻璃柱(5 cm×90 cm ......