马 兰 马 骏.2* 李茂星 段海婧，2 王泾舟 蔡香菊

    1.甘肃中医药大学，甘肃 兰州 730000；

    2.国家中医药管理局中医药科研三级实验室中药药理实验室，甘肃 兰州 730000；

    3.兰州军区兰州总院药剂科、全军高原环境损伤与防治重点实验室，甘肃 兰州 730050

    天蓝苜蓿黄酮组分的制备及清除DPPH自由基活性研究

    马 兰1马 骏1.2*李茂星3段海婧1，2王泾舟1蔡香菊1

    1.甘肃中医药大学，甘肃 兰州 730000；

    2.国家中医药管理局中医药科研三级实验室中药药理实验室，甘肃 兰州 730000；

    3.兰州军区兰州总院药剂科、全军高原环境损伤与防治重点实验室，甘肃 兰州 730050

    目的：以聚酰胺色谱柱分离天蓝苜蓿中黄酮组分，研究其清除DPPH自由基的能力。方法：采用多功能动态热回流提取浓缩机组提取天蓝苜蓿乙醇提取物，通过聚酰胺色谱柱吸附黄酮成分，不同浓度乙醇洗脱后，干燥得不同浓度乙醇洗脱物；采用DPPH自由基清除法，比较天蓝苜蓿不同洗脱液中黄酮组分的抗氧化能力。结果：天蓝苜蓿黄酮以三氯化铝显色后于紫外423nm有最大吸收；聚酰胺色谱柱上样洗脱，上样速度：12mL/min，洗脱速度：18mL/min；不同溶剂洗脱物清除DPPH自由基能力为：30%乙醇洗脱物>60%乙醇洗脱物>90%乙醇洗脱物>水洗脱物。结论：聚酰胺色谱柱能够富集分离天蓝苜蓿黄酮组分，且30%乙醇洗脱物清除DPPH自由基能力最强。

    天蓝苜蓿；聚酰胺色谱柱；黄酮；DPPH自由基

    天蓝苜蓿(MedicagolupulinaL.)为豆科苜蓿属(Medicago)植物的茎叶或地上部分，广泛分布于东北、华北、西北、华中和西南各地；夏、秋采收，洗净晒干备用。其味甘、微涩、性平；具有清热利湿，凉血止血，舒经活络功效；主治黄疸型肝炎[1]。常见的苜蓿有紫花苜蓿、天蓝苜蓿、南方苜蓿。研究表明，紫花苜蓿主要含有黄酮类、多糖类、香豆素类等化合物；具有抗氧化、抗衰老、调节免疫、降血脂等作用[2-4]，但对同科植物天蓝苜蓿的药理作用研究未见报道。实验以聚酰胺色谱柱分离天蓝苜蓿中黄酮组分，研究其清除DPPH自由基能力。

    1 仪器与材料

    1.1 仪器 6GU -50k多功能动态热回流提取浓缩机组(上海矩源机械设备有限公司)；RE-52AA旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)；HH-S26S恒温水浴锅(金坛大地自动仪器厂)；HP-8453紫外分光光度计(美国惠普公司)；LyoQuest-55plus冷冻干燥(西班牙Telster)；BPZ6033LC真空干燥箱(上海-恒科技有限公司)；YC1800喷雾干燥(上海雅程仪器设备有限公司)；BP2010S电子天平(德国Sartorius公司)；SpectraMax i3 全自动荧光酶标仪(美国Molecular公司) ......