HPLC法同时测定鼠曲草不同部位中3种黄酮类成分含量(2)
2 方法与结果2.1 色谱条件 采用Diamonsil-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相:甲醇-0.2%磷酸(50∶50);检测波长:360 nm;流速:1 mL/min;柱温:30 ℃;进样量:10 μL。理论塔板数按槲皮素、木犀草素、芹菜素峰计,应分别不低于5000、6000、7000。色谱图如图1所示。
2.2 测定波长的选择 将槲皮素、木犀草素、芹菜素分别溶解于甲醇中,使其浓度约为10 μg/mL,用紫外-可见分光光度计在190~400 nm的波长范围内进行扫描,得到吸收曲线如图2所示,因为考虑到同时检测,所以选择360 nm作为测定波长。
2.3 对照品溶液的制备 分别精密称取槲皮素6.08 mg于10 mL容量瓶、木犀草素1.47 mg于2 mL容量瓶、芹菜素2.35 mg于5 mL容量瓶,加甲醇溶解,定容置刻度线,得到浓度为0.608 mg/mL槲皮素、0.735 mg/mL木犀草素、0.470 mg/mL芹菜素储备液,再分别精密吸取1 mL上述储备液于5 mL容量瓶 ......
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