*

    1.大理大学，云南 大理 671000；2.云南省药物研究所，云南 昆明 650111；3.云南白药集团创新研发中心，云南 昆明 650111；4.云南省中药和民族药新药创制企业重点实验室，云南 昆明 650111

    藜芦为百合科藜芦属植物，以根、根茎入药，用于治疗高血压、血吸虫、脑出血、中风痰壅、喉痹不通、癫痫、疟疾、骨折、跌打损伤、疥癣和恶疮等疾病，民间也用于癌症的治疗[1-5]。藜芦的主要活性成分为甾体类生物碱，其中介芬胺含量较高，达生物总碱的21.28%[6-12]。介芬胺具有抗肿瘤、抑制细菌生长的作用，其可以与Hh通路上游激活因子Smo特异性结合而抑制通路信号的传递，进而发挥抑制肿瘤细胞的增值效应；细胞实验也证实了介芬胺对胰腺癌细胞ASPC-1、PANC-1有明显的抑制作用[13-20]。同时，介芬胺也为毒性成分，且毒性较强[1,20]，主要表现为致畸、生殖毒性等[20-22]。

    介芬胺既是藜芦药材中的活性成分，也是毒性成分。在藜芦临床应用时，应进行药物浓度监测，防止过高的药物浓度导致的毒性反应。目前，国内外文献中尚无关于人血浆中介芬胺血药浓度测定方法的报道。本实验旨在建立人血浆中介芬胺血药浓度的LC-MS/MS测定方法，并对此方法进行方法学验证，为藜芦临床应用时血药浓度测定提供可靠检测方法。

    1 仪器与试剂

    1.1 仪器 高效液相色谱仪(Agilent 1200SL，美国Agilent公司)、三重四级杆质谱仪(API3200 Q-Trap，美国AB公司)、台式高速冷冻离心机(Allegra 64R，美国Beckman公司)、电子天平(DV215CD，上海 OHAUS公司)。

    1.2 试剂 介芬胺(Jer)对照品(含量：98.90%，批号：SBJ150625，南京森贝伽生物科技有限公司)、非那西汀(Phe)对照品(含量：98% ......