浙江中医药大学药学院药理研究所，浙江 杭州 311402

    乳头皲裂(nipple trauma)作为哺乳期的常见病之一，在世界各地具有较高的发病率，处理不当时可以引起局部渗血、溃疡甚至导致乳痈。研究显示，由于乳头皲裂所引起的疼痛和焦虑通常会导致产妇放弃母乳喂养和早期断奶[1-2]。然而，母乳中包含大量对婴儿有益的生物活性物质，具有营养、抗菌及免疫调节等多种功能，对母亲而言可以帮助子宫收缩、减少乳腺癌和卵巢癌等的危险[3]。因此，乳头皲裂的治疗对推进母乳喂养显得至关重要。

    中医验方蛋黄油，古籍中称为“雏凤膏”，性平，味甘，具有解毒消肿，敛疮生肌之效[4]。蛋黄油的临床应用历史悠久，始见于北周姚僧垣撰《集验方·卷九》，云：“治汤火烧疮方，熟鸡子一十个，取黄，炒取油，入十文腻粉，搅匀，用鸡翎扫疮上，三、五日，永除瘢痕”[5]。此外在《本草纲目》等诸多书籍中均有记载[6]。研究表明，蛋黄油中含有脂肪类、蛋白质氨基酸类、维生素、矿物质四类成分，其中维生素A、维生素D和卵磷脂等物质对人体皮肤的再生和代谢有着重要作用[7]。此外，雏凤膏中还添加有芝麻油和纯天然羊毛脂。关于蛋黄油用于烫伤、乳头皲裂等的研究[8-10]已有报道，但是雏凤膏治疗乳头皲裂的具体机制研究还未见报道。研究针对雏凤膏对乳腺上皮细胞MCF 10A细胞的增殖影响及机制展开深入的探究，希望为雏凤膏应用于乳头皲裂的治疗提供理论依据，从而进一步推进母乳喂养。

    1 材料

    1.1 细胞 乳腺上皮细胞MCF 10A购买于中国科学院上海细胞库

    1.2 雏凤膏的制备 蛋黄油提取物1份;芝麻油0.5～1.5份;纯天然羊毛脂1.5～2.5份。其中，所述的蛋黄油提取物的制备方法如下：

    将鸡蛋煮熟，剥取蛋黄，压碎，用食品级乙酸乙酯冷浸或超声提取，得到的提取液减压回收乙酸乙酯，得到所述的蛋黄油提取物。

    取纯羊毛脂4份，置于容器中，加热至约45?C，将羊毛脂熔化，再加入2份蛋黄油中间体，1份芝麻油基质，熔合，不断搅拌，冷却至室温，即得雏凤膏。

    1.3 试剂 MCF 10A专用培养基(Lonza公司批号cc-4136)；0.25% Trypsin-EDTA (GENVIEW 公司批号49120010100)；青霉素-链霉素(吉诺生物医药技术有限公司批号12123101)；RIPA裂解液(碧云天生物批号P0013C)；碧云天BCA蛋白浓度测定试剂盒(碧云天生物技术有限公司批号P0011)；四甲基亚唑蓝(MTT)(美国SIGMA公司批号M2128)；DMSO(美国SIGMA公司批号WXBB1799V)；细胞周期染色液(BD公司批号 5205995)；一抗cyclin E1、cdk2(戴格生物科技生物有限公司批号 db1668、db299、)、p21(abcam公司批号 18209)、β-Actin、β-Tubulin(CST公司批号 #4970、#2128)；辣根过氧化物酶标记山羊抗兔二抗(BIO-RAD公司批号350001312)；辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠二抗(BIO-RAD公司批号350003248)；ECL显影液(BIO-RAD公司批号102030719) ......