遵义医学院药学院，贵州 遵义 563006

    白芨是一种珍稀名贵中药材，为兰科植物白芨(Bletillastriata)的干燥块茎，其味苦、甘、涩，归肝、肺、胃经，具有收敛止血、消肿生肌等功效[1]，野生品主产于贵州、四川和湖南等地，已被列为国家濒危珍稀植物保护名录[2]。药理学研究表明，白芨具有抗肿瘤、抗氧化、抗菌和促进伤口愈合等作用[3]。近年来，白芨在抗肿瘤方面时有报道[4-6]，其主要活性成分为大量含有的多糖类物质。

    白芨中的主要化学成分有多糖类、菲类、联菲类、联苄类、甾体和三萜类等物质。菲类化合物是目前报道从白芨块茎中分离得到的较多的一类化学成分，该类化合物芳环上的取代基主要有羟基、甲氧基和对羟苄基，是白芨中的主要活性成分，联菲类化合物主要有白芨联菲A、B、C和白芨联菲醇A、B、C[7-9]。联苄类化合物是白芨中的另一大类化学成分，也是生物合成菲类化合物的前体物质。此外，白芨中还分离得到了较为特殊的C-31和C-32环菠萝蜜烷型三萜化合物[10]，C-32环菠萝蜜烷型三萜只在少数几种植物中被报道，两个1位氧苷的甾体皂苷据报道具有很好的抗肿瘤活性[11]。本研究对白芨进行水提醇沉提取白芨粗多糖，同时保留有机小分子物质部分，使用人肝癌HepG2细胞对其进行体外抗肿瘤活性实验，以期能为白芨的后续研究和临床应用提供实验依据。

    1 仪器与材料

    1.1 药材与细胞 白芨药材购买于遵义市百姓人大药房，经遵义医学院药学院生药学教研室吴发明博士鉴定为兰科植物白芨属白芨的干燥块茎。人肝癌HepG2细胞为本实验室细胞库冻存备用。

    1.2 试剂 胎牛血清、DMEM/F12细胞培养基、胰蛋白酶和青霉素/链霉素溶液购买于美国Gibco公司；二甲基亚砜购买于美国Sigma公司；PBS缓冲液粉末购买于北京鼎国生物科技有限公司；CCK8试剂购于江苏碧云天生物科技有限公司；低熔点琼脂糖购买于北京索莱宝科技有限公司；无水乙醇、氯仿、正丁醇、苯酚等均为国产分析纯试剂 ......