HPLC法测定止眩胶囊中丹酚酸B的含量(1)
基金项目：
作者简介：郭钦安(1983-)，男，汉族，本科，主管中药师，研究方向为中药材、中成药质量控制。E-mail：guoqinan123@163.com
通信作者：
【摘 要】 目的：建立止眩胶囊制剂中丹酚酸B的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法：色谱柱waters xterra C18柱(4.6mm×250mm，5μm)，流动相为甲醇：乙腈(3∶[KG-*3/5]1)-1.0%甲酸溶液(34∶[KG-*3/5]66)，流速1mL/min，柱温：30℃，检测波长286nm。结果：丹酚酸B的进样量在92.5～1850ng范围内与峰面积呈良好线性关系，r=0.9999;平均回收率98.64%，RSD为1.47%。结论：所建立的方法准确、可靠、专属性强，可用于止眩胶囊制剂的质量控制。
【关键词】 止眩胶囊;丹酚酸B;高效液相色谱法
【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517(2019)7-0031-02
Abstract：Objective To establish a method for the determination of salvianolic acid B in zhixuan capsule. Methods HPLC and waters xterra C18 column (4.6 mm×250 mm， 5μm) were adopted，with methanol： acetonitrile (3∶[KG-*3/5]1) - 1.0% formic acid(34∶[KG-*3/5]66) as the mobile phase at the flow rate of 1.0 ml/min.The column temperature was set at 30 ℃，and the UV detection wavelength was 286 nm.Results the injection amount of salvanolic acid B in the range of 92.5 ～ 1850ng had a good linear relationship with the peak area， r=0.9999. The average recovery was 98.64% and the RSD was 1.47%.Conclusion the method is accurate， reliable and specific， and can be used for the quality control of zhixuan capsule.
Keywords：Zhixuan Capsule; Salvianolic Acid B; HPLC
止眩膠囊由丹参、当归、延胡索、鸡血藤、莪术、蒲公英、石决明、薏苡仁、夏枯草、泽泻、续断、桃仁、醋三棱、川芎等14味药物组成，具有活血化瘀、通脉止眩等功效，适用于原发性高血压。该胶囊为医院制剂，原有质量标准较低，不能全面反映制剂质量状况，为更好地控制该制剂的内在质量，提高标准，拟增加含量测定等内容，方中以丹参为君药，走血分、通血脉，攻擅活血化瘀，现代医学研究表明，丹参具有扩张冠状动脉，增加冠状血流量，促进毛细管血管网开放，扩张血管等作用[1]。基于此，笔者选择丹参作为控制指标，建立了其有效成分丹酚酸B的含量测定方法。
1 仪器与材料
1.1 仪器 Waters 2695高效液相色谱仪(2998二极管阵列检测器，美国Waters);AUW120D型电子分析天平(日本岛津);BRANSONIC 超声波清洗机(美国BRANSON);Medium-s300超纯水器(四川优普超纯科技有限公司)。
1.2 材料 丹酚酸B对照品(批号：111562-201514，中国食品药品检定研究院);止眩胶囊(批号：180101、180102、180103，自制);乙腈为色谱纯，水为超纯水。
2 方法与结果
2.1 溶液的制备
2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取丹酚酸B对照品1.85mg，置10mL棕色量瓶中，加75%甲醇至刻度，摇匀，制得每1mL含0.185mg的溶液，即得。
2.1.2 供试品溶液的制备 取本品内容物1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75%甲醇50mL，密塞，称定重量，超声处理(功率150W，频率40kHz)30min，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀，取续滤液，即得。
2.1.3 阴性对照溶液的制备按处方比例依法配制除丹参以外的阴性制剂，精密称取适量，按“2.1.2”项下方法制备阴性对照溶液。
2.2 色谱条件 色谱柱：Waters xterra C18(4.6mm×250mm，5μm);流动相：甲醇乙腈(3∶[KG-*3/5]1)-1.0%甲酸溶液(34∶[KG-*3/5]66);检测波长：286 nm;流速：1 mL/min;进样量：10μL。
2.3 含量测定方法学考察
2.3.1 专属性试验 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各10μL，注入液相色谱仪中，记录色谱图(如图1所示)。试验表明，阴性对照溶液的色谱峰中，在丹酚酸B对应的位置上无干扰，专属性较强。
2.3.2 线性关系的考察 精密量取“2.1.1”项下对照品溶液0.1、0.2、0.4、0.8、1.0、2.0mL至2mL量瓶中，用75%甲醇定容，得不同浓度对照品溶液，分别进样10μL，测定峰面积积分值，以峰面积积分值为纵坐标，进样量ng为横坐标作图，得一直线回归方程：Y=1 102.1X-58097，r=0.999 9，表明丹酚酸B在进样量92.5～1 850 ng范围内与峰面积呈良好的线性关系。, http://www.100md.com
作者简介：郭钦安(1983-)，男，汉族，本科，主管中药师，研究方向为中药材、中成药质量控制。E-mail：guoqinan123@163.com
通信作者：
【摘 要】 目的：建立止眩胶囊制剂中丹酚酸B的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法：色谱柱waters xterra C18柱(4.6mm×250mm，5μm)，流动相为甲醇：乙腈(3∶[KG-*3/5]1)-1.0%甲酸溶液(34∶[KG-*3/5]66)，流速1mL/min，柱温：30℃，检测波长286nm。结果：丹酚酸B的进样量在92.5～1850ng范围内与峰面积呈良好线性关系，r=0.9999;平均回收率98.64%，RSD为1.47%。结论：所建立的方法准确、可靠、专属性强，可用于止眩胶囊制剂的质量控制。
【关键词】 止眩胶囊;丹酚酸B;高效液相色谱法
【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517(2019)7-0031-02
Abstract：Objective To establish a method for the determination of salvianolic acid B in zhixuan capsule. Methods HPLC and waters xterra C18 column (4.6 mm×250 mm， 5μm) were adopted，with methanol： acetonitrile (3∶[KG-*3/5]1) - 1.0% formic acid(34∶[KG-*3/5]66) as the mobile phase at the flow rate of 1.0 ml/min.The column temperature was set at 30 ℃，and the UV detection wavelength was 286 nm.Results the injection amount of salvanolic acid B in the range of 92.5 ～ 1850ng had a good linear relationship with the peak area， r=0.9999. The average recovery was 98.64% and the RSD was 1.47%.Conclusion the method is accurate， reliable and specific， and can be used for the quality control of zhixuan capsule.
Keywords：Zhixuan Capsule; Salvianolic Acid B; HPLC
止眩膠囊由丹参、当归、延胡索、鸡血藤、莪术、蒲公英、石决明、薏苡仁、夏枯草、泽泻、续断、桃仁、醋三棱、川芎等14味药物组成，具有活血化瘀、通脉止眩等功效，适用于原发性高血压。该胶囊为医院制剂，原有质量标准较低，不能全面反映制剂质量状况，为更好地控制该制剂的内在质量，提高标准，拟增加含量测定等内容，方中以丹参为君药，走血分、通血脉，攻擅活血化瘀，现代医学研究表明，丹参具有扩张冠状动脉，增加冠状血流量，促进毛细管血管网开放，扩张血管等作用[1]。基于此，笔者选择丹参作为控制指标，建立了其有效成分丹酚酸B的含量测定方法。
1 仪器与材料
1.1 仪器 Waters 2695高效液相色谱仪(2998二极管阵列检测器，美国Waters);AUW120D型电子分析天平(日本岛津);BRANSONIC 超声波清洗机(美国BRANSON);Medium-s300超纯水器(四川优普超纯科技有限公司)。
1.2 材料 丹酚酸B对照品(批号：111562-201514，中国食品药品检定研究院);止眩胶囊(批号：180101、180102、180103，自制);乙腈为色谱纯，水为超纯水。
2 方法与结果
2.1 溶液的制备
2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取丹酚酸B对照品1.85mg，置10mL棕色量瓶中，加75%甲醇至刻度，摇匀，制得每1mL含0.185mg的溶液，即得。
2.1.2 供试品溶液的制备 取本品内容物1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75%甲醇50mL，密塞，称定重量，超声处理(功率150W，频率40kHz)30min，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀，取续滤液，即得。
2.1.3 阴性对照溶液的制备按处方比例依法配制除丹参以外的阴性制剂，精密称取适量，按“2.1.2”项下方法制备阴性对照溶液。
2.2 色谱条件 色谱柱：Waters xterra C18(4.6mm×250mm，5μm);流动相：甲醇乙腈(3∶[KG-*3/5]1)-1.0%甲酸溶液(34∶[KG-*3/5]66);检测波长：286 nm;流速：1 mL/min;进样量：10μL。
2.3 含量测定方法学考察
2.3.1 专属性试验 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各10μL，注入液相色谱仪中，记录色谱图(如图1所示)。试验表明，阴性对照溶液的色谱峰中，在丹酚酸B对应的位置上无干扰，专属性较强。
2.3.2 线性关系的考察 精密量取“2.1.1”项下对照品溶液0.1、0.2、0.4、0.8、1.0、2.0mL至2mL量瓶中，用75%甲醇定容，得不同浓度对照品溶液，分别进样10μL，测定峰面积积分值，以峰面积积分值为纵坐标，进样量ng为横坐标作图，得一直线回归方程：Y=1 102.1X-58097，r=0.999 9，表明丹酚酸B在进样量92.5～1 850 ng范围内与峰面积呈良好的线性关系。, http://www.100md.com