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编号:13516535
活性多糖提取纯化及结构解析的研究进展(3)
http://www.100md.com 2020年1月15日 《中国民族民间医药·上半月》 20202
     3.1 多糖分子量测定 多糖属于大分子物质,获取分子量大小及分布对认识多糖结构具有重要意义,常用检测方法有:超速离心法,高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)、电泳法和旋光度测定法,质谱法,光散射法。

    HPGPC法测定多糖分子量的原理是:不同分子量多糖组分在凝胶柱上的保留时间不一致,常选用一系列已知分子量的标准物质(常用葡聚糖[37]),建立分子量与保留时间的关系曲线,然后根据待测样品在凝胶柱上的保留时间求得相对分子质量及分子量分布范围。该方法快速,分辨率高,重现性好,是目前测定多糖分子量的主要方法,但HPGPC法测定结果与所用标准品密切相关,若标准品与待测样品的性质,形状等有较大的差别[38],或所选凝胶柱,流动相不恰当,则会造成较大的误差。

    光散射法是应用多角度激光光散射仪(MALLS)测定多糖的绝对分子质量,当激光照射到多糖样品时,会在各个方向产生散射光,在任何方向的光散射强度与分子质量和溶液的浓度成正比,散射光角度的变化与分子的尺寸大小有关[39],故而可通过相关参数的变化,求得待测样品的分子质量,该方法不需要标准品,结果的可靠性较高,但该方法要求待测样品为单一组分,否则将无法得到准确的分子量信息 ......
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