响铃草薄层鉴别研究(1)
【摘 要】 目的：建立响铃草的薄层色谱鉴别方法。方法：采用硅胶GF254薄层板，黄酮类物质芹菜素、金合欢素、染料木素和山柰素为对照品，环己烷-乙酸乙酯-水(8∶5∶1)为展开剂，对响铃草药材进行薄层色谱定性鉴别。结果：薄层色谱图中可见与染料木素、金合欢素以及山柰素在其相对应位置显相同颜色斑点，且斑点清晰，方法耐用性好。结论：该方法安全、易操作、专属性强，可作为响铃草的薄层鉴别方法。
【关键词】 响铃草;薄层鉴别;质量标准
【中图分类号】R285 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517(2020)23-0047-04
TLC Identification of Crotalaria ferruginea
SHI Yang1 WANG Huijuan2 PENG Lijun2 HAO Yongjia1 ZHANG Min2*
1.Guizhou University of Traditional Chinese Medicine， Guiyang 550025，China;2.Guizhou Medicine Edicine Edible Plant Resources Research and Developmant Center， Guizhou University， Guiyang 550025， China
Abstract：Objective To establish TLC identification method of Crotalaria ferruginea. Methods Using flavonoid apigenin， acacetin， genistein and kaempferol as reference substances， Crotalaria ferruginea were identified by TLC on silica gel GF254 plate with developing solvent hexamethylene- ethyl acetate- water (8∶5∶1).Results Based on the position and color of reference substances， it showedthe corresponding spots of Crotalaria ferruginea in TLC. The spots are clear and the method has good durability.Conclusion The developed method is safe， easy to operate and strong in specificity， and can be used TLC identification method of Crotalaria ferruginea.
Keywords：Crotalaria ferruginea; TLC; Quality Standards
響铃草是云南白族常用的民间药材，为豆科猪屎豆属条叶猪屎豆C. linifolia L. f. 或假地蓝Crotalaria ferruginea Grah.的根或全草，又名马铃草、狗响铃、响铃子、黄花野百合等[1]。响铃草史载于明代《滇南本草》，其味苦、微酸，性寒，具有补脾肾、敛肺气、利水、解毒之功效。主要用于久咳痰血、耳鸣耳聋、头晕目眩、梦遗、慢性肾炎、膀胱炎、肾结石、扁桃体炎、淋巴腺炎、恶疮、月经不调等[2]。
响铃草的主要化学成分为黄酮、生物碱、香豆素、有机酸和甾醇等，其中黄酮类物质芹菜素、金合欢素、染料木素和山柰素通常作为评价该药材质量的重要指标[3-5]。目前，从响铃草质量标准中关于黄酮类物质薄层色谱鉴别的研究中发现仅存在对染料木素的鉴别，尚未见对于其他黄酮类成分的薄层鉴别报道。因此，本文以云南省景谷县威远镇产响铃草为研究对象，对其进行薄层鉴别方法研究，建立响铃草的薄层鉴别方法，为响铃草的质量标准建立提供支持。
1 仪器与试药
1.1 仪器 DK-98型电热恒温水浴锅(天津市泰斯特仪器有限公司);HZY-A200型电子分析天平(福州华志科学仪器有限公司);RE-52AA旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);QY-20三用紫外分析仪(上海奥瑞德精密仪器有限公司);DGG-9246A电热恒温鼓风干燥箱(上海齐欣科学仪器有限公司);FW-400A倾斜式高速万能粉碎机(北京中兴伟业仪器有限公司)。
1.2 试药 对照品芹菜素(Q-002-180131)、金合欢素(J-066-180517)、染料木素(R-001-181216)和山柰素(S-004-180911)，均购于成都瑞芬思生物科技有限公司;9批响铃草药材样品购于药材市场，分别产于四川、青川、四川成都、云南省景谷县威远镇、广西、贵州省安顺、福建、云南、贵州，经贵阳中医药大学魏升华教授鉴定为豆科植物假地蓝Crotalaria ferruginea Grah.的根或全草。
2 方法与结果
2.1 供试品溶液的制备 参照文献总黄酮的提取方法[6]： 称取样品粉末用95%乙醇1∶10倍量水浴回流提取2h，过滤;再用95%乙醇1∶6倍量水浴回流提取2次，每次1.5h;合并3次滤液，水浴减压回收至无醇味，稠膏趁热用5%碳酸钠溶液溶解，过滤;再用浓盐酸调pH=2～3，过滤，将沉淀干燥即得黄酮粗品。考虑到提取时间较长，故将提取时间减为2h，其余条件不变，与提取时间为5h对比，发现不同的提取时间对供试液展开效果影响不大，考虑到节省时间，故将提取时间定为2h。另外，还考察了不同碱性处理和酸性条件对供试液的影响，结果发现原条件5%的碳酸钠溶液和pH=2～3处理的供试液展开效果最优。, 百拇医药(石洋 王慧娟 彭礼军 郝永佳 张敏)
【关键词】 响铃草;薄层鉴别;质量标准
【中图分类号】R285 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517(2020)23-0047-04
TLC Identification of Crotalaria ferruginea
SHI Yang1 WANG Huijuan2 PENG Lijun2 HAO Yongjia1 ZHANG Min2*
1.Guizhou University of Traditional Chinese Medicine， Guiyang 550025，China;2.Guizhou Medicine Edicine Edible Plant Resources Research and Developmant Center， Guizhou University， Guiyang 550025， China
Abstract：Objective To establish TLC identification method of Crotalaria ferruginea. Methods Using flavonoid apigenin， acacetin， genistein and kaempferol as reference substances， Crotalaria ferruginea were identified by TLC on silica gel GF254 plate with developing solvent hexamethylene- ethyl acetate- water (8∶5∶1).Results Based on the position and color of reference substances， it showedthe corresponding spots of Crotalaria ferruginea in TLC. The spots are clear and the method has good durability.Conclusion The developed method is safe， easy to operate and strong in specificity， and can be used TLC identification method of Crotalaria ferruginea.
Keywords：Crotalaria ferruginea; TLC; Quality Standards
響铃草是云南白族常用的民间药材，为豆科猪屎豆属条叶猪屎豆C. linifolia L. f. 或假地蓝Crotalaria ferruginea Grah.的根或全草，又名马铃草、狗响铃、响铃子、黄花野百合等[1]。响铃草史载于明代《滇南本草》，其味苦、微酸，性寒，具有补脾肾、敛肺气、利水、解毒之功效。主要用于久咳痰血、耳鸣耳聋、头晕目眩、梦遗、慢性肾炎、膀胱炎、肾结石、扁桃体炎、淋巴腺炎、恶疮、月经不调等[2]。
响铃草的主要化学成分为黄酮、生物碱、香豆素、有机酸和甾醇等，其中黄酮类物质芹菜素、金合欢素、染料木素和山柰素通常作为评价该药材质量的重要指标[3-5]。目前，从响铃草质量标准中关于黄酮类物质薄层色谱鉴别的研究中发现仅存在对染料木素的鉴别，尚未见对于其他黄酮类成分的薄层鉴别报道。因此，本文以云南省景谷县威远镇产响铃草为研究对象，对其进行薄层鉴别方法研究，建立响铃草的薄层鉴别方法，为响铃草的质量标准建立提供支持。
1 仪器与试药
1.1 仪器 DK-98型电热恒温水浴锅(天津市泰斯特仪器有限公司);HZY-A200型电子分析天平(福州华志科学仪器有限公司);RE-52AA旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);QY-20三用紫外分析仪(上海奥瑞德精密仪器有限公司);DGG-9246A电热恒温鼓风干燥箱(上海齐欣科学仪器有限公司);FW-400A倾斜式高速万能粉碎机(北京中兴伟业仪器有限公司)。
1.2 试药 对照品芹菜素(Q-002-180131)、金合欢素(J-066-180517)、染料木素(R-001-181216)和山柰素(S-004-180911)，均购于成都瑞芬思生物科技有限公司;9批响铃草药材样品购于药材市场，分别产于四川、青川、四川成都、云南省景谷县威远镇、广西、贵州省安顺、福建、云南、贵州，经贵阳中医药大学魏升华教授鉴定为豆科植物假地蓝Crotalaria ferruginea Grah.的根或全草。
2 方法与结果
2.1 供试品溶液的制备 参照文献总黄酮的提取方法[6]： 称取样品粉末用95%乙醇1∶10倍量水浴回流提取2h，过滤;再用95%乙醇1∶6倍量水浴回流提取2次，每次1.5h;合并3次滤液，水浴减压回收至无醇味，稠膏趁热用5%碳酸钠溶液溶解，过滤;再用浓盐酸调pH=2～3，过滤，将沉淀干燥即得黄酮粗品。考虑到提取时间较长，故将提取时间减为2h，其余条件不变，与提取时间为5h对比，发现不同的提取时间对供试液展开效果影响不大，考虑到节省时间，故将提取时间定为2h。另外，还考察了不同碱性处理和酸性条件对供试液的影响，结果发现原条件5%的碳酸钠溶液和pH=2～3处理的供试液展开效果最优。, 百拇医药(石洋 王慧娟 彭礼军 郝永佳 张敏)