耿 亚 赵喜兰 张 强

    1.漯河医学高等专科学校第二附属医院，河南 漯河 462300;2.漯河医学高等专科学校，河南 漯河 462002

    漆姑草(SpergulajaponicaSw.)为石竹科植物漆姑草的全草，分布于东北、华北、华东、中南、西南及陕西、广西等地，具有凉血解毒、杀虫止痒之功效[1]。文献显示[2]，漆姑草总黄酮对肿瘤具有一定的抑制作用，其中已分离得到的主要黄酮衍生物有：6，8-二-C-葡萄糖基芹菜素、6-C-阿拉伯糖基-8-C-葡萄糖基芹菜素、8-C-葡萄糖基芹菜菜、x″-O-鼠李糖基-6-C-葡萄糖基芹菜素[3]。目前，漆姑草总黄酮多采用溶剂提取法，但该法溶剂用量比较大，所得黄酮含量不高[4]，还需要进一步纯化。大孔树脂是一种重要的聚合物吸收剂，常用于自然资源中生物活性化合物的制备分离和纯化。由于其高效，低污染和操作简单的特点，大孔树脂已被广泛用于从天然植物中分离和纯化活性成分，包括黄酮、生物碱、类萜和皂甙等[5]。本研究系统分析不同极性的大孔树脂对漆姑草总黄酮的吸附和解吸能力，在最佳条件下，使用选定的树脂纯化漆姑草总黄酮。

    1 材料与仪器

    1.1 试验药物 漆姑草采集于贵阳花溪，经漯河医学高等专科学校赵喜兰副教授鉴定为石竹科植物漆姑草SpergulajaponicaSw.的全草；芦丁对照品购自南京景竹生物科技有限公司(批号：20180211)。

    1.2 主要试剂与仪器 D101、NKA-9、ADS-5、ADS-17、AB-8及ADS-F8大孔树脂均购自天津南开和成科技有限公司；其余试剂均为分析纯。R-220 旋转蒸发仪购自上海亚荣生化仪器厂；双光束紫外可见分光光度计购自上海谱元仪器有限公司。

    2 方法与结果

    2.1 含量的测定

    2.1.1 对照品溶液的配制 精密称取芦丁对照品12.38 mg，置于25 mL量瓶中，加甲醇5 mL，超声辅助溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀，得质量浓度为0.495 mg/mL的芦丁对照品溶液。

    2.1.2 供试品溶液的制备 精密称定漆姑草(粉碎，过40目)1 g，加入75%甲醇50 mL，超声辅助提取30 min，过滤，置于50 mL量瓶中，加75%甲醇至刻度，摇匀，即得。

    2.1.3 标准曲线的制备 精密吸取芦丁对照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 mL，置10 mL量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀。分别吸取上述芦丁溶液0.5 mL与2.5 mL蒸馏水混合，然后加入5%(m/v)的NaNO2溶液(150 μL) ......