孙 雪 梁建庆,2* 何建成 马利芳

    1.甘肃中医药大学基础医学院，甘肃 兰州 730000；2.敦煌医学与转化教育部重点实验室，甘肃 兰州 730000；3.上海中医药大学基础医学院，上海 201203

    帕金森病(Parkinson's disease，PD)是全球第二大神经退行性疾病，全世界现有约580万PD患者，中国患病人数约为260万，居世界第一位[1]。PD的主要病理特征是中脑黑质致密部多巴胺(dopamine，DA)能神经元变性缺失，导致纹状体内DA含量减少到80%以上，患者出现临床症状[2]。明确DA能神经元损伤的机制，对PD的防治具有重要意义。笔者利用Illumina HiSeq高通量测序平台技术，获得正常组、模型组、敦煌颤震方组大鼠右侧黑质及纹状体的转录组信息，对筛选得到的差异表达基因进行KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)富集分析，旨在为深入探究DA能神经元的存活方式以及对敦煌颤震方的药理作用等分子应答机制奠定基础。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物及条件 健康雄性SPF级SD大鼠，体质量180～200g，鼠龄38～40周，18只，由甘肃中医药大学实验动物中心提供，许可证号码：SCXK(甘)2015-0002。饲养期间保持自由饮水和进食，饲养环境温度为(24±1)℃，湿度为(55±5)%，实验前适应性喂养1周。

    1.2 主要试剂和仪器 6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine，6-OHDA, 批号：MKBP0832V)、阿扑吗啡(apomorphine，APO，批号：SLBF6369V)、抗坏血酸(批号：063K1082)：美国Sigma公司产品。戊巴比妥钠(批号：WS20130212)：上海中西药业股份有限公司产品；庆大霉素(批号: 20230675)：上海第一制药厂产品，0.3 g/支。

    大鼠脑立体定位仪：RWD-68003型，深圳瑞沃德生命科技有限公司；高速冷冻离心机：Multifuge IS-R，德国THERMO公司；超声破碎仪：XL 2000，美国MISONIX公司；微量进样器：5 μL，上海第三分析仪器厂；漩涡混匀器：XW-80A，上海医科大学仪器厂；分析天平：910324，Sartorius anglytic；秒表：926266，上海秒表厂。

    1.3 药物制备 敦煌颤震方组成：山茱萸20 g，牛膝20 g，黄芪20 g，桂枝12 g，桃仁12 g，枳壳10 g，茯苓10 g ......