陈 明 向 阳*

    1.湖北民族大学医学部，湖北 恩施 445000； 2.风湿病发生与干预湖北省重点实验室(湖北民族大学)，湖北 恩施 445000

    类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis，RA)是一种慢性自身免疫性疾病，以关节滑膜慢性炎症及关节的进行性破坏为主要特征，以对称性多关节炎为主要临床表现，常见关节处疼痛、肿胀，呈持续性、反复性发作[1-4]。若不及时治疗，最终可引起关节畸形，丧失关节功能。RA的发病机制并不十分明确，滑膜细胞增殖与凋亡失衡是目前研究的重要方向。RA滑膜细胞的增殖与炎性细胞浸润、血管翳形成、侵蚀软骨及骨组织损伤为主要病理特征，从而导致关节结构破坏、畸形及功能丧失[5]。有研究[6]发现，RA患者滑膜细胞增生明显，而细胞凋亡率显著减少，却并没有因过度增生出现过多的细胞凋亡，提示滑膜细胞的凋亡障碍可能是导致滑膜增厚的原因之一。有研究[7-8]表明，湖北枫杨(Pterocarya Hupehensis Skan，PHS)通过影响线粒体凋亡途径诱导RA滑膜细胞凋亡，本实验建立CIA模型大鼠，用湖北枫杨水煎液进行干预，进一步探讨枫杨对CIA大鼠膝关节滑膜凋亡的影响。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 SD大鼠60只(200±20)g，购于武汉剑悦生物科技有限公司，许可证号为SCXK(辽)2015-0001。

    1.2 药材与试剂 湖北枫杨树皮，采自湖北省恩施市清江河滩，经袁林副教授鉴定，为胡桃科Juglandaceae枫杨属Pterocary Kunth植物。甲醇、异丙醇、冰醋酸(武汉市中天化工有限责任公司)；BCA试剂盒、HRP标记的羊抗兔二抗(武汉科瑞生物技术有限公司)；雷公藤多苷片(浙江得恩德制药股份有限公司)；牛Ⅱ型胶原、完全弗氏佐剂(美国Sigma公司)；大鼠IL-4、IFN-γ、TGF-β、IL-17AELISA试剂盒(酶联生物)；β-Actin 抗体、HRP 羊抗兔二抗(武汉博士德生物工程有限公司)；Bcl-xl、Caspase-8(abcam公司)；TNFRⅡ抗体(美国CST公司)；RIPA裂解液、彩色预染蛋白质分子量标准(10-180kD)、SDS-PAGE蛋白上样缓冲液、蛋白酶抑制剂(上海碧云天生物技术研究所) ......