李 运 张国强 高 鹏 李红玉 景 明* 魏 锋

    1.兰州市食品药品检验检测研究院/甘肃省种植中药材外源性污染物监测工程研究中心，甘肃 兰州 730000；2.兰州大学药学院，甘肃 兰州 730000；3.甘肃中医药大学药学院，甘肃 兰州 730000；4.中国食品药品检定研究院，北京 100050

    藏药熏倒牛(BiebersteiniaheterostemonMaxim.)为牻牛儿苗科熏倒牛属植物，是藏药“明见赛保”的原植物来源之一[1]。具有清热解毒、散肿止痛、清血热、祛风毒的功效，用于治疗各种炎症、结核症、丹毒、疟疾、咽喉肿痛、胃痛、全身水肿、中风等疾病[2]。目前，国内外学者主要侧重于熏倒牛中主要化学成分的分离鉴定及初步的药理活性研究，发现其主要含有黄酮、生物碱、苯丙素、香豆素、甾醇、糖类、挥发油和萜类等化合物[3-6]，并具有抗氧化[7]、降血糖[8]等活性，民间用于治疗小儿惊厥、抽搐、感冒发热等。在藏区的走访调研中发现，熏倒牛种子可用于治疗各种炎症类、胆囊类疾病及喉蛾、疔疮等。民族药用于疾病的治疗，药效的发挥往往基于多成分多靶点的共同作用，对于熏倒牛种子的研究，仅见于对其籽油中脂肪酸成分的分析[9]，从其中鉴定出11种脂肪酸类化合物，主要为棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸等成分，不饱和脂肪酸为74.23%，其中亚油酸含量为73.04%。

    氨基酸类成分是重要的生命物质，是组成蛋白质和酶的基本单元，能够增强机体免疫力、调节新陈代谢等[10]。对于熏倒牛种子中氨基酸的相关研究，未见报道。本文采用柱前衍生化法，利用氨基酸在偏碱性环境下，与异硫氰酸苯酯反应生成硫脲，经分子内环化，生成乙内酰苯硫脲类化合物，可用高效液相色谱仪进行定量分析。通过掌握熏倒牛种子中的氨基酸含量，以期为进一步研究藏药熏倒牛药材中的化学成分，深入挖掘其用药潜力和价值提供参考。

    1 仪器与材料

    1.1 仪器 Waters e2695高效液相色谱仪(包括四元泵、Waters 2998 PDA 检测器、自动进样器及 Empower工作站，美国Waters公司)；MS205DU型十万分之一分析天平(瑞士Mettle Toledo公司)；Milli-Q IQ 7000超纯水系统(德国默克密理博公司)；SBL-10DT超声波恒温清洗机(宁波新芝生物科技股份有限公司)；微量移液器(德国eppendorf股份公司) ......