基于氧化应激损伤和炎症反应探讨中风康复膏对脑缺血再灌注损伤模型大鼠的保护作用
脑组织,含水量,1材料与方法,2结果,3讨论
汪湛东 毛忠南 张 娜 吴 琳 刘娅楠 陶成斌 张延英 宋 冰 徐晓艳* 王 钢*1.甘肃中医药大学,甘肃 兰州 730000; 2.甘肃中医药大学附属医院,甘肃 兰州 730020
缺血性脑血管疾病是一种常见病,因其较高的发病率、致残率和死亡率给患者及患者家庭和社会均造成了严重的影响,且发病年龄出现年轻化的趋势[1]。脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury, CIRI)是指脑部出现一段时间的缺血后恢复血供,脑部功能不仅未见好转,反而出现严重障碍的一种现象,也是该病发生、发展的关键组成部分[2]。
中风康复膏(paste of stroke recovery, PSR)是甘肃中医药大学附属医院康复医学科毛忠南主任医师的治疗验方,在十几年的临床诊疗中对于证属肝肾亏虚、气虚血瘀、痰浊阻滞脑窍所致的脑卒中(出血性、缺血性) 恢复期进行干预,效果较为显著[3-4]。研究通过建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,从抗炎、抗氧化应激两个角度研究中风康复膏对脑缺血再灌注损伤的保护作用。
1 材料与方法
1.1 动物 健康雄性SD大鼠50只,SPF级,体质量220~280 g,由甘肃中医药大学实验动物中心提供,生产许可证号:SCXK(甘)2015-0002,使用许可证号:SYXK(甘)2015-0005。
1.2 药物与试剂 中风康复膏药物组成:黄精 25 g,黄芪40 g,当归60 g,制何首乌30 g,熟地黄20 g,生地黄20 g,豨莶草(酒制)15 g,鸡血藤20 g,枸杞子30 g,党参20 g,白术20 g,吴茱萸25 g,陈皮20 g,佛手20 g。所有药材加10倍量水浸泡12 h,应用多功能提取罐提取,按高压法煎煮2次,1煎150 min,2煎120 min,合并滤液加辅料浓缩,浓缩至每毫升药液中含生药7 g(即药液质量浓度为7 g/mL),经高温灭菌,在室温下冷却,放入冰箱中 4 ℃ 冷藏备用。
实验中使用丙二醛(MDA)检测试剂盒(批号A003-1-1)、一氧化氮合酶(NOS)检测试剂盒(批号A014-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)检测试剂盒(批号H052-1)、白细胞介素1β(IL-1β)检测试剂盒(批号H002),均购自南京建成生物工程研究所;细胞间黏附分子(ICAM-1)检测试剂盒(批号JCL1238)、血管细胞黏附分子(VCAM-1)检测试剂盒(批号JCL1243) ......
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