龙金兰 吴之坤

    贵州中医药大学，贵阳 花溪 550025

    黑骨藤(PeriplocaforrestiiSchltr.)为萝藦科(Asclepiadaceae)杠柳属(Periploca)植物，植物名为黑龙骨[1]，药材名为黑骨藤[2]。该植物多生长于海拔2000 m以下的山地疏林向阳处、阴湿的杂木林下或灌木丛中[1]，一般缠绕在周边乔木、灌木或者高大的草本植物上。目前，以黑骨藤为主要原料的药物黑骨藤追风活络胶囊已研发并投入市场，在治疗风寒湿痹、腰腿疼痛等疾病方面有很好的疗效。随着野生资源的大量使用，导致黑骨藤野生资源面临匮乏的危机，因此开展黑骨藤野生变家种的研究工作显得尤为紧迫。近年来有关黑骨藤的研究主要集中在化学成分、药理作用、质量控制及评价等方面，而在其繁育方面未做详细的研究。黑骨藤为多年生的藤本植物，其主要繁殖方式为有性繁殖，但有关其种子生物学方面的研究未见报道。本研究针对黑骨藤的种子进行萌发试验，考察种子萌发消毒条件、萌发基质、温度和光照等不同萌发因素的影响，筛选及优化黑骨藤萌发的最佳条件，以期为黑骨藤的野生变家种及可持续开发利用提供一定的参考。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料 黑骨藤成熟种子采集于贵阳市乌当区香纸沟(H 1017.61 m；N 26°46′26.90″；E 106°55′12.16″)，果实采集后放置于自然通风处及时晾干，人工剥出种子，去除种毛及杂质，选取颗粒饱满的种子，放置于4 ℃的短期种子库中保存，为后续实验做好准备。实验所用材料经贵州中医药大学鉴定教研室主任吴之坤副教授鉴定为萝藦科杠柳属植物黑骨藤(Periplocaforrestii)的种子，其凭证标本(凭证标本号：HGT201129002)存放于贵州中医药大学中药材种植(养殖)及加工研究所。

    1.2 仪器与试剂 仪器：RQX-400B、RQX-400G、RQX-300型人工智能培养箱(常州市华普达教学仪器有限公司)、AUW120D型十万分之一天平[岛津仪器(苏州)有限公司]、游标卡尺、XTZ-E型体式显微镜(上海光学仪器一厂)、Paola2053型解剖刀、BOXUN型立式压力蒸汽灭菌锅(上海博迅实业有限公司医疗设备厂)、培养皿(直径15 cm)、镊子、烧杯、纱布、滤纸(15 cm)、脱脂棉、河沙等实验室常用仪器设备及耗材。试剂：75%乙醇、0.1%高锰酸钾和5%次氯酸钠分别以批号为20201214无水乙醇(天津市鑫铂特化工有限公司)、20210103高锰酸钾(重庆川江化学试剂厂)、20210523次氯酸钠(天津市北辰方正试剂厂)与灭菌水配置而成 ......