基于COX2-PGE2途径探讨盆痛灵对气滞血瘀型EM大鼠的镇痛作用
组术,造模,1材料与方法,2检测指标及方法,3结果,4讨论
李宣儒 夏 玉 王 丽 余思云 刘晓庆 付金荣1.上海中医药大学龙华临床医学院,上海 200032;2.上海交通大学医学院附属第九人民医院,上海 200011;3.上海中医药大学附属龙华医院妇科,上海 200032
子宫内膜异位症(endometriosis,EM)是妇科常见的疑难杂症,在全世界育龄期妇女中占10%,是导致痛经和慢性盆腔疼痛的主要原因之一[1]。其反复发作的疼痛严重影响女性的身心健康,使部分患者出现抑郁焦虑倾向,故如何缓解患者的疼痛,提高患者生活质量已成为临床治疗EM的关键。课题组前期研究[2]证实盆痛灵可以缓解EM大鼠的疼痛,本研究在前期EM造模的基础上加入夹尾,建立病证结合的气滞血瘀型EM大鼠疼痛模型,以进一步探究盆痛灵对气滞血瘀型EM大鼠的镇痛作用及其机制。
1 材料与方法
1.1 动物 9周龄清洁级SD雌性大鼠,规格为(180±20)g,购自北京维通利华实验动物有限公司,合格证号:SCXK(浙)2019-0001,动物实验严格遵守上海中医药大学实验动物伦理委员会的要求(No.PZSHUTCM201106008)。
1.2 药物 盆痛灵颗粒剂(三棱,莪术,延胡索,川楝子,虎杖),龙华医院中药房提供,符合质检标准。按成年人体重为50 kg计算,每日生药量为51 g,SD大鼠按人体每日用药量的6.25倍进行换算,故每日给药量为6.375 g·kg-1·d-1。
1.3 主要试剂和仪器 试剂:反转录试剂盒PrimeScriptTMRT reagent Kit(批号:RR037A,TaKaRa公司),荧光定量PCR试剂盒 TB Green?Premix Ex TaqTM(批号:RR420A,TaKaRa公司),辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG(H+L)(批号:A0208,碧云天),Cox2(D5H5)XP?Rabbit mAb#12282(批号:12282S,CST),Trizol(批号:G8011-100mL,Adamas life),大鼠前列腺素E2(PGE2)酶联免疫分析(批号:MM-0068R1,酶免),大鼠雌二醇(E2)酶联免疫(批号:MM-0575R1,酶免)。仪器:VonFrey纤维丝(型号:NC12775-99,NorthCoast),全自动血流变测试仪(型号:ZL9100C,北京众驰伟业科技发展有限公司),PCR基因扩增仪(型号:PROFLEX,赛默飞),实时荧光定量基因扩增仪(型号:7500 ......
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