王亮亮,王 哲,高旭红,李黎黎,马中子,孟宪峰

    脑源性神经营养因子 (brain-derivedneurotrophicfactor,BDNF)是神经营养因子家族的一个重要成员,广泛分布于中枢神经系统,具有重要的神经保护作用并对学习记忆功能有重要的作用[1-2]。同时,研究还发现阿尔茨海默病 (Alzheimer disease,AD)患者海马、皮质、基底前脑神经元中 BDNF和它的受体 (tyrosinekinaseB,trkB)表达明显下降,提示BDNF可能与 AD呈一定的相关性[3-5]。因此探讨 BDNF在 AD患者脑内表达下降的原因,并寻找有效药物以抑制细胞内下调BDNF表达的信号通路或增加细胞内 BDNF表达成为治疗 AD的措施之一。盐酸多奈哌齐 (donepezil,DN)作为一种乙酰胆碱酯酶抑制剂广泛用于 AD的治疗,近几年的研究发现除以上的机制外,其对 AD神经元还有保护作用,使神经元免于丢失[6]。但其是否能通过影响 AD患者脑内 BDNF的表达而发挥神经保护作用的研究还较少,故本研究通过向大鼠侧脑室注射微量 Aβ25-35建立 AD动物模型[7],然后予以 DN治疗,通过免疫组化及免疫印迹方法观察大鼠海马区 BDNF的表达变化,以期探讨 DN对 AD脑内神经元保护的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物及分组 相同环境下饲养的清洁级雄性 Wistar大鼠 24只 (中国医科大学实验动物部,许可证号:SYXK[辽]2003-0013),3月龄,体质量 (200±20)g,采用数字表法将大鼠随机分为对照组、模型组和干预组。

    1.2 手术及给药方式 采用大鼠侧脑室内定点注射方法:用0.9%氯化钠溶液将 Aβ25-35制备成质量浓度为 2μg/μl的Aβ25-35溶液,37℃孵育 1周,形成聚合状态的 Aβ25-35[8]。模型组大鼠经水合氯醛 (30mg/kg)麻醉后,备皮,置于脑立体定位仪上,固定头部 ......