孔令斌,房玉海,丁守华,杨志寅,卜志强,刘 东,陈 鹏

    2型糖尿病 (T2DM)是由遗传因素和环境因素共同作用导致的一类代谢异常综合征。WHO报告显示,1998年 DM居全球疾病死因顺位的第六位,疾病负担顺位第三位,近年来其发病率急剧升高,而且其发病年龄日趋年轻化,已成为世界各国日益关注的公共卫生问题[1]。因此研究 T2DM发生的危险因素,对于实施有针对性的预防干预措施,延缓或防止 T2DM及其并发症的发生、发展具有重要的临床意义[2-5]。T2DM的病因复杂,并非由单一因素所致,遗传、环境因素及不良生活方式和行为习惯在疾病的发生、发展过程中均起着非常重要的作用[6]。由于饮食模式影响机体的血糖、血脂的代谢,因此,采用各种有效的干预措施来降低血糖和血脂水平是目前许多国家 DM及心脑血管疾病防治工作的重点[7-8]。目前已有大量研究证实了以膳食干预为主的综合干预措施的有效性,然而,在临床上并不是每一位 T2DM患者经过膳食行为干预后都能够取得满意的效果,考虑可能与患者的遗传背景有关[9]。因此,有必要探讨基因多态性对 T2DM的发病及其治疗干预措施的影响,为制定更为个体化的膳食干预对策提供科学依据,减少治疗的盲目性。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 于 2003年 9月—2005年 9月在山东省梁山县疾病预防控制中心糖尿病门诊随机抽取 378例自愿参加研究的新发 T2DM患者为研究对象,均符合 WHO 1999年糖尿病诊断标准[10]。检测其脂蛋白脂酶 (LPL)基因 S447多态性,根据基因型分为两组,一组为 LPL S/X+X/X基因型 (A组),另一组为 S/S基因型 (B组)。然后对两组患者只进行饮食干预,干预时间为 2年,随访结束后,共随访到依从性强的T2DM患者 342例,随访率为 90.48%,其中 A组 60例,B组282例,检测两组患者的空腹血糖 (FPG)、血脂等指标并进行比较。干预前两组患者的性别、年龄、血糖、血脂等指标间差别均无统计学意义 (P>0.05,见表 1、2),具有可比性。

    1.2 方法 取患者空腹肘静脉血5 ml,将其中 3 ml血液当日分离血清,采用全自动血液生化分析仪检测血糖、血脂;另外2 ml用 5%的 EDTA-Na2(1 ml血液加 20μl抗凝剂 ),用于基因组 DNA提取。(1)基因组 DNA抽提:低渗溶血法制备白细胞,苯酚氯仿抽提 DNA。(2)PCR扩增:以提取的 DNA为模板,利用设计的上、下游引物特异性扩增 LPL基因 S447位点的特异片段 ......