可溶性转铁蛋白受体在急性溶血性贫血诊断中的意义
计数,1资料与方法,2结果,3讨论
刘 冯,莫东华,刘智屏,文飞球转铁蛋白受体 (transferring receptor,TfR)是一种跨膜糖蛋白,存在于大多数细胞表面,正常情况下,细胞内铁代谢所需的铁离子需经过 TfR进行转运,可溶性转铁蛋白受体 (soluable transferring receptor,sTfR)是细胞膜 TfR经蛋白水解酶作用生成的片段,在血浆或血清中能进行检测[1],其水平与细胞 TfR呈平行关系,因此检测血清 sTfR水平可间接反映总 TfR水平。由于大多数血清 sTfR来自红系骨髓前体细胞,受体数量的多少和红细胞生成速度有关[2-3]。急性溶血状态下,红细胞生成速度增加,因此,有理由将血清 sTfR作为评价溶血性贫血的指标。由于以往的研究主要侧重于血清 sTfR与儿童缺铁性贫血的相互关系的研究[4],个别研究虽然显示溶血性贫血时该指标有变化[5-6],但血清 sTfR在急性溶血性贫血中的意义尚待进一步明确。本研究检测 34例不同类型的溶血性贫血患儿的血清 sTfR水平,旨在为急性溶血性贫血的诊断提供新的依据。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取 2003年 3月—2006年2月在我院就诊的各种类型的急性溶血性贫血患儿 34例作为溶贫组,这些患儿虽有慢性溶血性贫血疾病 (地中海贫血),但血红蛋白 (Hb)在一段时间内处于一个相对稳定的水平,而入院前因各种诱因在短期内出现溶血急性加重 (发作性),Hb水平迅速下降。34例患儿中男 22例,女 12例,年龄 6个月 ~12岁。选取同期进行体检的正常儿童或上呼吸道感染的非贫血儿童共 12例作为对照组,男 8例,女 4例,年龄 6个月 ~12岁。各种溶血性贫血的诊断依据张之南等主编的 《血液病诊断及疗效标准 》 (第 3版 )。
1.2 样本采集及保存 体检儿童于体检时抽取外周静脉血 2 ml,其他儿童均于入院后第 2天抽取外周静脉血 2 ml,分离血清置 -80℃冰箱保存。
1.3 血清 sTfR的测定[7]有关操作方法严格按试剂盒说明书进行,先进行预实验,条件稳定后再进行样本检测。所有样品均于整批内测完。方法如下:(1)将 20μl标准品或血清样本加到包被有鼠抗 sTfR单抗的 96孔板的孔中,轻轻混匀后,室温孵育1 h;(2)弃血清,用 400μl的洗液洗孔 4次,然后加100μl HRP-鼠抗 sTRF二抗,室温孵育 1 h;(3)弃二抗,用 400μl的洗液洗孔 4次,加 100μl显色底物,室温避光孵育 30 min;(4)加 100μl终止液终止显色反应,在 30min内测定其吸光度值 (A450) ......
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