陈仲波,羊正炎,俞 华,朱笕青,牟翰舟,吕卫国

    宫颈癌是一种常见的严重危害妇女健康的恶性肿瘤,人乳头瘤病毒 (HPV)感染是引起宫颈癌及其癌前病变的主要原因[1],但 HPV基因型与宫颈癌的关系尚待进一步探讨。由于受分型技术的限制,我国宫颈癌 HPV基因型的流行病学资料较为有限。本研究应用可检测 21种 HPV基因型的导流杂交基因芯片技术对 1 169例宫颈癌患者进行 HPV检测和分型,为宫颈癌的预防、高危人群筛查和特异性疫苗的研制提供一定的实验依据。

    1 资料与方法

    1.1 临床资料 选择 2007—2008年在浙江省肿瘤医院就诊并经病理学确诊的 1 169例浸润性宫颈癌患者为研究对象。年龄22～86岁,平均 48.2岁。按 1995年为际妇女科联合会 (FIGO)标准[2]分期:I期,413例;Ⅱ期,526例;Ⅲ期,224例;Ⅳ期,6例。组织学类型按 2003年 WHO分级标准分型[3]:鳞癌 1 092例,腺癌 41例,腺鳞癌 25例,其他 11例(包括:透明细胞癌 9例,小细胞癌 2例)。

    1.2 方法

    1.2.1 标本采集及保存 使用专用的 HPV采样刷采集非月经期宫颈癌患者的宫颈脱落细胞标本,采样前 3 d内无阴道用药史,采样前 1 d禁止性生活。以专用细胞保存液保存标本。采集的标本置 4℃冰箱保存,2周内检测。

    1.2.2 HPV分型检测 用凯普导流杂交技术及其配套试剂(潮州凯普生物化学有限公司提供),对21种常见的 HPV基因型进行分型检测,包括 13种高危型 HPV(16、18、31、33、35、39、45、 51、 52、 56、 58、 59和 68),5种低危型 HPV(6、11、42、43和 44)和 3种中国人常见的 HPV基因型(53、66和 CP8304)。检测过程包括:样本 DNA提取;PCR扩增;导流杂交;酶标显色;结果判断,根据芯片上 HPV基因型分布相应位点判断为何种基因型。

    1.3 统计学方法 采用 SPSS 12.0软件进行统计处理,HPV基因型感染率比较采用 χ2检验,以 P<0.05为差异有统计学意义 ......