石 莺，黄建军，唐章文，谭亚丽，吉晓霞，凌 晖，苏 琦

    二烯丙基二硫 (diallyl disulfide，DADS)是大蒜中主要的脂溶性成分。DADS处理肿瘤细胞后，肿瘤细胞结构及形态学表现有明显的向正常细胞分化的趋势[1]。进一步运用蛋白质组学技术研究发现，DADS处理人胃癌MGC803细胞前后，有24种蛋白表达出现变化[2]，其中表达显著上调的维甲酸相关孤核受体α(RORα)在DADS诱导MGC803细胞分化过程中的作用机制不明。RORα在调节体内多种组织细胞的发育和(或)分化以及对抗疾病的发生发展过程中发挥重要作用[3]。有研究显示，RORα具有抑制前列腺癌细胞[4]、结肠癌细胞[5]、乳腺癌细胞[6]增殖的作用，但是 RORα与胃癌的关系尚不清楚。故本研究通过观察DADS对体外培养的人胃癌SGC7901(中分化腺癌)细胞与MGC803细胞形态结构的影响，观察DADS处理前后人胃癌细胞中RORα蛋白表达的差异，探讨DADS诱导人胃癌细胞分化的分子机制以及RORα与胃癌发生发展的关系。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂 SGC7901、MGC803细胞由中南大学湘雅医学院细胞中心引进。DADS为Fluka公司产品。核蛋白抽提试剂盒GK5112为上海捷瑞生物公司产品。BCA蛋白定量试剂盒为Pierce公司产品，RT-PCR逆转录试剂盒为Promega公司产品，总RNA提取试剂盒为美国Omega公司产品，均购于华美生物工程公司。兔抗人RORα多克隆抗体购自Santa Cruz公司，羊抗兔二抗购于武汉博士德生物公司。其他常规的化学用品、新生牛血清、RPMI-1640培养基均购自长沙瑞晶生物公司。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞培养 所有细胞用含体积分数为10%胎牛血清的RPMI1640培养液培养于37°C，含体积分数为5%二氧化碳(CO2)的恒温培养箱中培养。取对数生长期细胞，按所需浓度接种于培养瓶或培养板内，待6～8 h细胞完全贴壁后，加用或换用含有药物的培养液，培养至预定时间。本实验中采用30 mg/L DADS浓度作为MGC803处理组的浓度。

    1.2.2 形态学观察 利用倒置显微镜对活细胞在接触处理因素前后细胞形态学及生长状况的变化进行动态观察。制备细胞爬片，常规HE染色于镜下观察处理前后细胞形态学的改变 ......