李颖丰,周晖登

    金黄色葡萄球菌 (SA)是引起院内和社区感染的常见病原菌之一,由于抗菌药物的广泛应用,耐药菌株迅速增多,耐药谱不断变迁;尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)呈高致病性和多重耐药,且在世界范围流行,这给临床抗感染治疗带来极大困难。随着耐万古霉素 MRSA的不断出现[1-2],MRSA感染的流行已引起高度重视和关注。为了解本地区儿童感染 SA对常用抗菌药物的耐药及 MRSA流行情况,本研究对临床分离 SA儿童株进行耐药模式和 MRSA随机扩增多态 DNA分型 (RAPD)研究,现报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 菌株来源 2007年 1月—2009年 12月在广西壮族自治区妇幼保健院住院患儿送检的痰、血、尿、咽拭子及伤口分泌物等标本中分离的 SA共 348株,质控菌株 SA AT25923购于卫生部临检中心。

    1.2 药物敏感试验 采用法国梅里埃 ATB半自动微生物鉴定/药敏分析仪及 GPI药敏卡进行药敏试验,结果判定及质量控制按美国临床实验室标准化委员会 (CLSI)2006版标准[3]进行,以苯唑西林最低抑菌浓度 (MIC)>4μg/ml为 MRSA。β-内酰胺酶检测采用头孢硝基噻吩显色法进行,纸片变为红色为阳性。

    1.3 同源性分析 按试剂盒 (北京赛百盛公司产品)说明书提取 SA染色体 DNA,采用美国 PE公司 5700PCR仪进行扩增,总反应体系为 50μl[10×buffer 5μl,20 mmol/L Mg2+5 μl,10 mmol/L dNTP 1 μl,50 pmol/μl引物 (5-CCG CTA CCGA-3)0.5μl,双蒸水 36.5μl,模板 2μl],扩增条件:94℃预变性 4 min,94℃变性 60 s、42℃复性 60 s、72℃延伸 60 s,35个循环,72℃延伸 5 min。产物经含溴化乙锭(EB)的 1.2%琼脂糖凝胶电泳,根据电泳条带确定型别。

    1.4 统计学方法 药敏资料采用 WHONET 5.4软件进行分析。

    2 结果

    2.1 SA分布率 检出 SA的标本主要来自新生儿科 37.93%(132株),其次为儿科 PICU 27.01%(94株),呼吸科18.97%(66株),儿外科 10.63%(37株),儿内科 5.46%(19株) ......