江学良，崔慧斐，任 晶

    溃疡性结肠炎 (ulcerativecolitis，UC)的发病机制仍未明确，目前认为UC的发病可能与肠道菌群失调、肠黏膜屏障功能缺陷、肠道通透性增高、肠道内成分诱发的异常免疫反应等因素有关[1]。其中，肠黏膜屏障损伤是导致UC腹泻的重要原因，因此修复损伤的肠黏膜是治疗UC腹泻的关键措施之一[2]。

    治疗UC的主要药物美沙拉嗪通过抑制炎症间接减轻对肠黏膜屏障的损伤，而非直接修复损伤肠黏膜屏障。已有研究表明，思密达可有效修复慢性腹泻患者肠道黏膜损伤[3]。本研究通过观察思密达联合美沙拉嗪治疗前后UC大鼠模型腹泻症状改善情况及肠黏膜通透性、肠黏膜形态的变化，以期阐明思密达治疗UC腹泻的机制。

    1 材料与方法

    1.1 动物 选取封闭群健康成年Wistar大鼠80只，雌雄各半，质量250～350 g。动物由山东大学动物中心提供。

    1.2 方法

    1.2.1 模型制备 实验动物适应性喂养标准饲料1周后，用二硝基氯苯 (DNCB)和乙酸 (AA)复合法造模[4-5]。大鼠颈背部用10%Na2S脱毛后，每天以20 g/L DNCB丙酮液滴背1次，0.3 ml/次，连续14 d。第15天用直径3 mm的尼龙导管经肛门插入结肠8 cm处，注入0.04 mmol/L(0.1%)DNCB乙醇 (50%)液0.25 ml，第16天同部位注入80 ml/L AA溶液2 ml，准确定时15 s后再用5 ml 0.9%氯化钠注射液冲洗。造模完成后1周观察大便性状、结肠大体形态及组织学 (光镜和电镜)改变，符合UC表现即造模成功。

    1.2.2 实验方法 造模成功后1周，将大鼠随机分为两组，每组40只。美沙拉嗪治疗组 (对照组)大鼠喂服美沙拉嗪0.2 g·kg-1·d-1，8周。思密达联合美沙拉嗪治疗组 (联合治疗组)大鼠喂服美沙拉嗪0.2 g·kg-1·d-1，天然蒙脱石0.6 g·kg-1·d-1，8 周。

    1.3 观察指标 分别在治疗前和治疗8周后记录腹泻症状变化情况，测定肠道黏膜通透性，光镜下观察结肠组织学变化，电镜下观察肠黏膜超微结构包括微绒毛变化、组织紧密连接(TJs)、上皮细胞间隙 (dilated intercellular spaces，DIS)、肠基底膜细胞核分裂相和细胞凋亡情况。

    (1)肠黏膜通透性测定采用尿中乳果糖与甘露醇的比率(L/M)，L/M值增大，说明肠黏膜通透性增高。(2)结肠炎症程度分级按以下方法:0级，无多形核细胞;1级，固有层有少量多形核细胞浸润;2级 ......