杨焕东，杨桂莲，张春元，张春梅，王慎田

    血管内皮生长因子 (vascular endothelial growth factor，VEGF)和内皮抑素 (endostatin)分别是目前已知的作用最强的血管生成促进因子和抑制因子，深入研究两者在肿瘤生长、浸润、转移中的作用及手术前后的变化规律，对肿瘤早期诊断和判断预后具有重要的临床意义。关于原发性肝癌二者联合检测的意义未见报道。本研究采用ELISA法测定原发性肝癌患者血清VEGF和内皮抑素水平，并以慢性乙型肝炎肝硬化和健康人群作为对照，探讨血清VEGF和内皮抑素水平的变化及其与临床病理特征的关系。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 选取2005年3月—2009年3月在潍坊医学院附属益都中心医院消化科和普外科收治的原发性肝癌患者163例 (肝癌组)，多属于中、晚期，其中男112例，女51例;年龄28～69，平均 (53.2±10.5)岁。根据临床症状和体征、B超、CT、肿瘤标志物确诊，部分病例术后经病理切片进一步诊断。另选取同期慢性乙型肝炎肝硬化患者75例 (肝硬化组)，其中男59例，女16例;年龄33～67岁，平均 (54.8±9.6)岁。同期健康志愿者及健康查体检者60例 (正常对照组)，其中男42例，女18例;年龄24～71岁，平均 (52.3±11.2)岁。试验前对所有受试者履行知情同意告知并获同意后入选本试验。

    1.2 方法 所有患者于入院后未治疗前清晨空腹 (健康人群则随机清晨空腹)抽取外周静脉血4 ml，室温放置30～60 min后3 000 r/min离心10 min，分离并留取血清置-70℃低温冷冻备用。部分手术和 (或)介入治疗的患者于术后2周同法收集血清冷冻备用。用ELISA法测定血清VEGF及内皮抑素水平，检测方法严格按试剂盒说明书进行。全自动酶标仪测定光密度值 (D值)，VEGF检测波长为450 nm，内皮抑素检测波长为490 nm。绘制标准曲线，通过标本的D值在标准曲线上查出其对应浓度。人VEGF ELISA试剂盒购自深圳晶美生物工程有限公司，人内皮抑素ELISA试剂盒购自美国R＆D公司。

    1.3 统计学方法 采用SPSS 13.0统计软件进行统计学分析。计量资料以表示，各组间均数比较用t检验或方差分析 ......