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编号:1089411
MRPL48基因在代谢综合征诊断中的意义探讨
http://www.100md.com 2011年5月16日 中国全科医学 2011年第18期
核糖体,膜电位,线粒体,1材料与方法,2结果,3讨论
     孙鲁宁,张 宁,宋晓宇,郑宁宁,张海鹏

    代谢综合征 (metabolic syndrome,MS)是各种代谢危险因素在同一个体中簇集的状态,以中心性肥胖、高血糖、血脂异常、高血压等聚集发病为特征。近年来,MS发病率在全球呈迅速上升趋势,欧美等国家MS已累及成年人口的1/4[1];中华医学会糖尿病分会的一项最新调查结果显示,我国MS的总体患病率为13.7%[2]。目前诊断MS的标准主要是依据患者的血生化检测结果制定的,因患者的个体差异很大,仅凭血生化检测结果往往不足以反映机体的整体代谢状况。若能从MS的发病机制入手,在基因或蛋白质水平上找到更加理想的特异性诊断标准,无疑会对MS的临床诊治产生重要的意义。

    线粒体是细胞代谢网络的中心枢纽,它在细胞代谢过程中起着重要作用。近十多年来,线粒体功能与MS的关系正逐渐受到关注。线粒体核糖体负责线粒体基因 (mtDNA)编码蛋白的翻译,其异常会引起线粒体膜电位下降和能量产生不足,从而引起体内的各种代谢障碍,进而导致MS的发生。基于此,本研究采用RNA干扰的方法抑制Hela细胞线粒体核糖体大亚基蛋白48(mitochondrial ribosomal proteins,MRPL48)基因的表达,观察线粒体膜电位的改变,从而明确MRPL48在维持机体能量代谢中的作用,并进一步探讨MRPL48在MS临床诊治中的意义。

    1 材料与方法

    1.1 材料 GIBCO?DMEM培养液、胎牛血清 (Invitrogen公司);MRPL48 shRNA质粒 (Open Biosystems公司);LipofectamineTM2000转染试剂 (Invitrogen公司);WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 (博士德公司);MRPL48抗体(Abcam公司);辣根过氧化物酶标记的兔抗人二抗 (Sant Cruz公司);硝酸纤维素膜 (Bio-Rad公司);线粒体荧光染料JC-1(Molecular Probes公司) ......

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