李 敏，张艳赏，张明明，闫 萍

    已有研究表明卵巢癌组织中有促性腺激素释放激素 (Gn-RH)Ⅰ、GnRHⅡ及其受体的表达[1]，显示人卵巢癌细胞具有合成和分泌GnRH的功能。目前国内关于GnRH激动剂对卵巢癌细胞系作用的报道较少，本研究以GnRH受体阳性的人卵巢低分化浆液性乳头状癌细胞株OVCAR3为研究对象，使用Gn-RH激动剂曲普瑞林作用于OVCAR3细胞，观察其在体外水平对卵巢癌细胞生长的抑制作用及对GnRHⅠ受体和GnRHⅡ受体的影响，初步探讨曲普瑞林抗肿瘤作用的可能机制。

    1 材料与方法

    1.1 细胞株 人卵巢低分化浆液性乳头状癌细胞株OVCAR3由河北医科大学第四医院科研中心保存。

    1.2 实验仪器 相差显微镜 (LH50A型，日本OLYMPUS公司)，低温超速离心机 (UNIVERSAL-30RF型，德国Hettich公司)，-80℃超速低温冰箱 (MDF-382型，日本SANYO公司)，-152℃超低温冰柜 (MDF-1152 ATN型，日本SANYO公司)，紫外分光光度计 (756型，上海光学仪器厂)，PCR仪 (GeneAmp 9600型，美国PE珀金-埃尔默公司)，高速低温离心机 (RS-28型，德国Hettich公司)，UVP凝胶扫描系统 (GelDoc-It TS型，美国UVP公司)，双恒定时电泳仪 (DYZ-22A型，北京市六一仪器厂)，桥式电泳仪 (DYY-Ⅲ型，北京市六一仪器厂)。

    1.3 主要试剂 RPMI-1640干粉 (美国GIBCO公司)，胎牛血清 (美国 GIBCO公司)，胰蛋白酶 (美国 Sigma公司)。MTT粉 (Sigma公司)，DMSO试剂 (成都化学试剂厂)，曲普瑞林 (辉凌制药生产，由河北医科大学第二医院生殖中心提供)RT-PCR使用的试剂:Trizol Reagent(为Invitrogen公司产品)，氯仿，异丙醇，焦磷酸二乙酯DEPC(天根生化科技有限责任公司)，反转录酶 (AMV-RT，美国Promega公司)，核糖核酸酶抑制剂 (RNase Inhibitor，美国 Promega公司)，dNTP mix(美国 Promega公司)，PCR mix(美国 Promega公司)，随机引物 (Random primers，美国Promega公司)，琼脂糖 (agarose，美国Promega公司)，Oligo dT 15(北京天根生化科技有限责任公司提供)，DNA Marker-D(北京赛百盛基因技术有限责任公司)。

    1.4 实验方法 ......