晏 淼，朱正秋，卞保祥，郑义同

    胃癌的死亡率在世界范围内居高不下，主要原因之一是胃癌的治疗进展缓慢，手术、放疗及化疗均不能取得满意效果，最终死于肿瘤复发及转移。自从靶向治疗问世后，获得了学者的广泛关注，也取得了不错的效果。目前，信号传导系统的缺陷和异常活化与肿瘤发生、发展及预后的关系已成为肿瘤分子生物学的研究热点，通过干预信号传导途径治疗也成为生物治疗的新兴领域。在这些信号传导通路中，Akt/mTOR信号通路是关键的细胞增殖相关信号通道之一，其活性的明显增强与许多恶性肿瘤的发生、发展密切相关。本研究采用PV-9000二步法免疫组化检测Akt/mTOR信号通路蛋白在胃癌组织中的表达情况，并结合临床病理特征进行探讨，以期为下一步临床应用提供理论及实践基础。

    1 材料与方法

    1.1 病例纳入标准 (1)组织病理学诊断结果经2名以上病理医师确诊为胃癌，胃癌的组织学类型以世界卫生组织(WHO)分类2000为准;(2)有明确的胃癌TNM分期和组织学分级，以美国癌症联合会 (AJCC)2010年第7版为准;(3)行根治性手术;(4)术前均未经放疗或化疗。

    1.2 标本 收集2009年9月—2010年9月连云港市第一人民医院手术切除的胃癌蜡块标本93例 (实验组)，病例均符合上述纳入标准。其中男67例，女26例;年龄26～83岁，平均61岁。从93例患者中随机抽取40例，取其癌旁组织 (距肿瘤组织边缘5 cm以上)作为对照组，其中男26例，女14例;年龄36～79岁，平均61岁。

    1.3 主要试剂及方法 兔抗人多克隆抗体p-Akt、兔抗人单克隆抗体p-mTOR、PV-9000检测试剂均购自北京中杉生物技术有限公司。采用PV-9000二步法免疫组化检测，实验步骤按照说明书严格操作，用PBS代替一抗做阴性对照。必须同时满足以下条件才能判断为阳性，否则为阴性:(1)阳性细胞定位明确;(2)间质清晰、无背景着色;(3)阳性细胞占5%以上。

    1.4 统计学方法 采用SPSS l7.0软件进行统计检验。计数资料采用χ2检验，并行Spearman相关分析。P<0.05为差异有统计学意义。

    2 结果

    2.1 p-Akt、p-mTOR在胃癌组织和癌旁组织中的表达p-Akt、p-mTOR这两种蛋白阳性信号主要位于细胞质内 ......