王 娟，陶贞霞，刘荣英，曹艳丽，国 虹，蔡秀萍，许卫星，王建华，吴秀然，李海玲

    原发及转移的肺部、胸膜肿瘤均可引起癌性胸腔积液。目前癌性胸腔积液多采用化疗药物胸腔内注射治疗，部分应用免疫增强剂如香菇多糖、白介素-2等胸腔内注射治疗[1-2]，但采用以上方法治疗多维持时间短，且对全身肿瘤无治疗作用。我科采用多因子诱导的杀伤 (CIK)细胞培养后全身应用配合CIK细胞联合白介素-2胸腔内注射治疗癌性胸腔积液，取得了良好的治疗效果，现报道如下。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 2008年6月—2010年12月我科收治的癌性胸腔积液患者15例，其中原发肺癌4例，乳腺癌肺转移3例，弥漫性大B细胞淋巴瘤 (DLBCL)肺转移3例，肾癌肺转移3例，急性白血病2例，原发病均经手术切除后病理证实(急性白血病除外)。其中急性白血病、乳腺癌肺转移、弥漫性大B细胞淋巴瘤及3例肺癌患者均应用常规化放疗全身治疗后效果不佳，1例原发肺癌患者拒绝再次应用化疗，肾癌患者为手术后1.5～2.0年，未接受其他治疗。

    1.2 细胞培养过程 应用血细胞分离机(COBE，美国)分离患者外周血单个核细胞约3×109个，在百级无菌层流病房超净工作台上经去浆、Ficoll淋巴细胞分离液 (密度1.077 g/ml购于天津灏洋生物有限公司)分离单个核细胞，并应用RPMI-1640细胞培养液 (购于美国Gibco公司)洗涤2次 (1 500 r/min离心，15 min/次)后，加入细胞培养瓶中 (购于美国 Costar公司)，放入37℃、5%CO2孵育箱中 (MCO-15AC日本三洋公司)，2 h后将悬浮细胞移入另外培养瓶中，调整细胞浓度为2×106/ml，加入CD3单抗 (武汉生物制品研究所)，γ-干扰素2 000 U/Ml(购于上海克隆生物高技术有限公司)，计为D0天，D1天加入白介素-2 1 000 U/ml(购于北京双鹭药业有限公司)诱导CIK细胞，每隔2～3 d换液1次，加入同量γ-干扰素、白介素-2，同时抽取离心后的上清液行细菌、真菌培养，放至37℃、5%CO2孵育箱中继续培养。

    1.3 培养产品的回输及鉴定

    1.3.1 培养产品的回输 在CIK细胞培养的 D11、D13、D15天 ......