赵菊芬，李 茜，张 琴，杨柳风，霍竹蕙，段丽娅

    子宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，在全球妇女癌症死亡率中位居第二。高危型人乳头状瘤病毒 (HPV)的持续感染是宫颈癌及其癌前病变的直接原因，对HPV感染的检测是诊断宫颈病变的重要依据[1]。HPV感染具有很强的地域性，不同国家与地区HPV感染基因分型的流行病学分布不同。为了解云南红河和文山多民族地区HPV感染流行病学特征，我院采用凯普医用核酸分子快速导流杂交基因芯片技术，对来自云南红河和文山多民族地区的2 887名女性进行生殖道21种HPV感染基因亚型筛查，分析常见感染亚型及分布特点，现报道如下。

    1 资料与方法

    1.1 临床资料 选取2009年3—9月在我院就诊的来自云南省红河和文山两个多民族地区的女性2 887名，年龄20～79岁，平均年龄 (38.9±2.4)岁。均无盆腔放疗、化疗史。

    1.2 仪器与试剂 HPV-DNA提取试剂盒、聚合酶链式反应(PCR)扩增仪、凯普Hybrimax医用核酸分子快速杂交仪，HPV基因微阵列分型检测试剂盒。

    1.3 标本采集和处理 采用凯普公司配套专用宫颈刷置于宫颈口，沿顺时针旋转5周获得足够的移行区上皮细胞样本取出，放入3 ml专用细胞保存液中，沿刷柄折痕处将宫颈刷柄折断，旋紧管盖，做好样本标记，立即送检。

    1.4 检测方法 HPV感染基因亚型检测步骤:(1)样本DNA提取:取标本500μl，以14 000 r/min离心1 min，弃上清液后，用试剂盒提取DNA。(2)PCR扩增:将PCR试剂及Taq酶按比例混合后在反应管加入24μl，混合后进行PCR扩增。每一批同时扩增HPV 18型阳性对照及阴性对照各一份。(3)核酸分子快速导流杂交:采用凯普医用核酸分子快速杂交仪及配套试剂盒，在杂交平台上放入标记有21种HPV基因型寡核苷酸探针的低密度基因芯片杂交膜，按试剂盒说明进行导流杂交，酶标显色。(4)结果判断:肉眼观察检测结果，阳性点为清晰可见的蓝紫色圆点，根据膜条HPV分布图，判断阳性点为何种类型的HPV。本检测将HPV分为21种基因亚型，其中13种高危亚型为:16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68，5种低危亚型为:6、11、42、43、44，中国人常见亚型为:53、66、CP8304。

    1.5 统计学方法 采用SPSS 11.5统计软件进行统计学分析，计数资料采用χ2检验，p<0.05为差异有统计学意义 ......